Caenorhabditis elegans (gusano)

En este video, mostramos un método para producir una población sincronizada con el desarrollo de C. elegans adultos estériles. El protocolo de ejemplo sincroniza gusanos para estudiar las tasas de consumo de oxígeno en animales vivos.

Este video describe una técnica para cribar rápidamente un solo nematodo en busca de un marcador genético mediante cribado por PCR. En el protocolo de ejemplo, seleccionamos la edición del genoma basada en CRISPR.

Este video describe un método tradicional basado en placas para medir la vida útil de C. elegans. El protocolo de ejemplo mide la vida útil de los gusanos tratados con ARNi.

C. elegans El comportamiento de puesta de huevos puede proporcionar información importante en estudios de desarrollo, reproductivos y anatómicos. Este video presenta los pasos importantes de un ensayo de puesta de huevos y muestra un experimento de muestra en el que se prueba la toxicidad reproductiva de un medicamento.

Este video describe la microinyección, un método común para crear cepas transgénicas de C. elegans. En el ejemplo, veremos el uso de la microinyección para introducir un complejo de ribonucleoproteína (RNP) para la edición de genes con bases CRISPR.

Este video describe el craqueo por congelación, un método para hacer que los tejidos de C. elegans sean accesibles para la tinción de anticuerpos mediante la interrupción de la cutícula.

Durante la obtención de imágenes en vivo de C. elegans, se puede usar una almohadilla de agarosa para mantener el nematodo quieto sin dañarlo ni secarlo. Este video describe cómo preparar una almohadilla de montaje simple para microscopía.

Este video presenta los conceptos detrás de las imágenes de calcio e incluye un protocolo de ejemplo para la obtención de imágenes de lapso de tiempo de gusanos contenidos en pocillos de agarosa moldeados.

Aquí, presentamos un ensayo para medir el SWIP, un fenotipo de comportamiento de C. elegans que ocurre durante un movimiento vigoroso como la natación. El protocolo de ejemplo analiza los enfoques de análisis manuales y automatizados.

Este video presenta el ensayo de habituación táctil, un método conductual de C. elegans para evaluar la mecanosensación y cuantificar el tiempo hasta la habituación.

Este video presenta la quimiotaxis en el nematodo C. elegans y muestra un protocolo de muestra que prueba la aversión quimiotáctica al sulfato de cobre.

Los investigadores pueden desencadenar el movimiento a demanda en C. elegans mediante la aplicación de un campo eléctrico que los gusanos detectan y responden. Este video presenta el comportamiento electrotáctico y muestra un protocolo de muestra que se realiza en un dispositivo microfluídico.

Este video describe el uso de software de video y seguimiento para registrar el movimiento de los gusanos en una arena. El protocolo de ejemplo mide el efecto de la exposición al etanol en la locomoción de los gusanos.

Este video describe un método para diseccionar gónadas de hermafroditas adultos de C. elegans, lo que da como resultado tejidos que son adecuados para la inmunotinción y la obtención de imágenes fluorescentes.

Este video presenta un ensayo de supervivencia a corto plazo que prueba un tratamiento para la toxicidad aguda o prueba una cepa genética para determinar la resistencia a una condición tóxica. El protocolo de ejemplo muestra un ejemplo de ensayo de supervivencia en el que se evalúa la capacidad de los gusanos para resistir el estrés oxidativo inducido por el paraquat (PQ).

C. elegans tiene dos tipos de músculos, sarcómero simple y sarcómero múltiple, o músculos estriados. Este video describe la disposición de los músculos estriados de la pared del cuerpo, que son responsables de la locomoción de un gusano, e incluye un protocolo de muestra para medir la morfología muscular utilizando un software de análisis de imágenes.

Este video presenta un método de herida por láser, que se utiliza para causar lesiones muy precisas en la epidermis del gusano. El protocolo de muestra proviene de un estudio de respuesta y reparación de heridas.

Este video presenta un método para visualizar y medir la integridad de la luz intestinal de C. elegans alimentando gusanos con dextrano marcado con FITC. El protocolo de ejemplo muestra el ensayo realizado con gusanos tratados con 3,3'-diindolilmetano (DIM) y alimentados con patógenos.

Este video describe un protocolo para teñir lípidos en gusanos enteros y fijos usando tinte rojo del Nilo. Para ver específicamente los lípidos neutros en el núcleo de las gotas de lípidos, imagine los espectros de emisión verde de los C. elegans teñidos.

Este video describe un método para disociar gusanos enteros en una suspensión unicelular adecuada para FACS o inmunoprecipitación de células intactas.

Aquí, describimos una técnica utilizada para visualizar el ADN genómico en nematodos fijos e intactos. El video incluye un ejemplo de protocolo para contar cromatina en ovocitos no fertilizados de C. elegans.

Este video presenta un método para aislar blastómeros de C. elegans de embriones tempranos. Las células resultantes son adecuadas para cultivos celulares o experimentos ex vivo.

Este video presenta un método para aislar y cultivar estérilmente células embrionarias de C. elegans in vitro.

Este video describe los principios detrás del tratamiento con ARNi en C. elegans y demuestra un protocolo para derribar lin-35 en una cepa de gusano transgénico.

RNAi es una poderosa herramienta genética disponible para los investigadores de C. elegans. Este video presenta un método para tratar más gusanos con ARNi que la alimentación en placa mediante el uso de condiciones de cultivo líquido.

Los nematodos se pueden propagar fácilmente en el laboratorio, en parte porque los hermafroditas pueden reproducirse por autofertilización. Sin embargo, los cruces genéticos y otros experimentos pueden requerir un gran número de machos. Este video describe un método para enriquecer a los machos de C. elegans.

La microinyección de transgenes generalmente resulta en cepas de C. elegans con grandes matrices extracromosómicas, que resultan en una expresión y transmisión variables del transgén. La irradiación UV puede inducir la integración cromosómica de la matriz y una transmisión transgénica más estable.