Drosophila Ensayo de excavación y tunelización: un método para evaluar la hipoxia tisular en larvas de mosca

Abstract

Fuente: Qiang, K. M., et al. Un ensayo de excavación/tunelización para la detección de hipoxia en larvas de Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2018).

Este video muestra un método para probar la hipoxia en larvas de Drosophila evaluando sus habilidades de excavación y tunelización. Con esta técnica, los investigadores pueden distinguir las larvas que experimentan privación de oxígeno de las que tienen déficits de desarrollo. El protocolo de ejemplo muestra la configuración de este ensayo.

Protocol

Este protocolo es un extracto de Qiang et al., A Burrowing/Tunneling Assay for Detection of Hypoxia in Drosophila melanogaster Larvae, J. Vis. Exp. (2018).

1. Preparación de larvas

1. Dos o más días antes de comenzar el ensayo, se colocaron cruces de las combinaciones experimentales y de control deseadas (mínimo 20 hembras y 10 machos cada una) en placas de puesta de huevos según lo descrito por Wieschaus y Nusslein-Volhard, pero utilizando vasos de precipitados de polipropileno de 50 mL y placas de Petri desechables de 6,0 cm que contenían agar uva y se untaron con pasta de levadura just....

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Reactivos
Levadura deshidratada
Concentrado de zumo de uva congelado	De Welch		Disponible en la mayoría de los grandes supermercados
Ácido acético glacial	Sigma-Aldrich	320099
Agar Drosophila	Productos de Apex Bioresearch	66-103
Metil-para-hidroxibenzoato	Productos de Apex Bioresearch	20-658
equipo
Vasos de polipropileno de 50 ml
Placas de Petri desechables de 6,0 cm	halcón	08757100B
Placas de Petri de plástico desechables de 10 cm	E+K Científico	EK-24104
Microespátulas de plástico	Corning Incorporado	Año 3012
Aguja de burla doblada	Nasco	S08848MH
Microscopio de disección			Cualquier microscopio con un aumento de 10-30X