Drosophila Disección de glándulas accesorias masculinas: un método para aislar células secundarias

Resumen

Fuente: Immarigeon, C., et al. Un protocolo basado en FACS para aislar ARN de las células secundarias de las glándulas accesorias masculinas de Drosophila. J. Vis. Exp. (2019).

Este video describe la disección de las glándulas accesorias de las moscas macho y muestra un ejemplo en el que la glándula aislada se disociará en una suspensión de una sola célula.

Protocolo

Este protocolo es un extracto de Immarigeon et al., Un protocolo basado en FACS para aislar el ARN de las células secundarias de las glándulas accesorias masculinas de Drosophila, J. Vis. Exp. (2019).

1. Soluciones y preparación de materiales

1. Prepare las siguientes soluciones.
   1. Medio suplementado de suero (SSM): Medio de Drosophila de Schneider complementado con un 10% de suero fetal bovino inactivado por calor y un 1% de penicilina-estreptomicina.
   2. Prepare alícuotas de 1x enzima de tripsina (por ejemplo, TrypLE Express Enzyme) y almacene a temperatura amb....

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Microscopio binocular para disección
Prismáticos con fuente de luz para GFP
Bunsen
Microtubos de plástico 1,5 mL	Eppendorf
Pinzas de disección fina
Suero fetal bovino	Gibco	10270-106	Calor inactivado antes de su uso
Platos de vidrio para disección
Cubitera
P1000	Gilson
P20	Gilson
P200	Gilson
papaína			Stock de 50U/mL
Pbs			Hecho en casa
Penicilina-Estreptomicina	Gibco	15070-063
Medio Drosophila de Schneider	Gibco	21720-001
Tipone 1250 μL punta graduada	Laboratorio estelar	S1161-1820
Tipone 200 μL punta biselada	Laboratorio estelar	S1161-1800
Enzima TrypLE Express	Gibco	12604013