Drosophila melanogaster Disección de ovarios: una técnica para la preparación de tejidos ex vivo

Resumen

Fuente: Parker, D. J., et al. Estudio de la estructura y función mitocondrial en ovarios de Drosophila. J. Vis. Exp. (2017).

Este video describe la anatomía general del ovario de Drosophila y presenta un método de disección de ovarios para obtener imágenes vivas o fijas.

Protocolo

Este protocolo es un extracto de Parker et al., Studying Mitochondrial Structure and Function in Drosophila Ovaries, J. Vis. Exp. (2017).

1. Preparación de Drosophila (las herramientas necesarias se muestran en Figura 1A)

1. Para cualquiera de los experimentos descritos, recoja Drosophila (mantenida a temperatura ambiente o 25 °C) dentro de los 5 días posteriores a la eclosión y colóquela en un vial lleno de 5 a 7 mL de alimento para Drosophila (ver Tabla de Materiales), con no más de 25 moscas en cada vial; manteng....

Resultados

Figura 1: Plan experimental y preparación. (A) Herramientas utilizadas en los métodos descritos: A. Vial de mosca; B. Medio de disección de insectos; C. Paraformaldehído; D. Cepillo para moscas; E. Plato de disección; F. Cubreobjetos; G. Tubo de microfuga. H. Plato con fondo de vidrio; I. Corredera de vidrio; J. Micropipeta de 1.000 μL; K. Micropipeta de 200 μL; L. Micropipeta de 2,5 μl;.......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Medios de Grace (medio de disección de insectos)	Fisher Científico	30611031-2
41 Paraformaldehído AQ	Ciencias de la Microscopía Electrónica	50-259-99
Polilisina	MP Biomedicals	ICN15017625
Viales para moscas	Fisher Científico	AS-515
Tapones de vial para moscas	Fisher Científico	AS273
Comida Jazzmix Drosophila (Comida Drosophila)	Fisher Científico	AS153
Portaobjetos de microscopio Azer Scientific EverMark Select	Fisher Científico	22-026-252
Cubierta de vidrio para microscopio	Fisher Científico	12-542-B
Mat Tek Corp Plato Mircrowell con fondo de vidrio	Fisher Científico	P35G-0-14-C
Levadura seca activa	Fisher Científico	ICN10140001
Pinzas Dumont #5	Tecnologías de la Ciencia Fina	11251-20
Portapasadores niquelado Moria	Tecnologías de la Ciencia Fina	26016-12
Pines de minucias	Tecnologías de la Ciencia Fina	26002-15
MYFP ( w[*]; P{w[+mC]=sqh-EYFP-Mito}3 )	Centro de Valores de Bloomington	7194
Almohadilla para moscas	Cosas de moscas	59-118
cerbatana	Cosas de moscas	54-104
Aguja de cerbatana	Materia de mosca	54-119
Microscopio de disección	Carl Zeiss	Stemi 2000