Test de Alimentación: Evaluación de las Preferencias Alimentarias en Drosophila melanogaster

Resumen

Fuente: Bovier, T. F., et al. Métodos para probar la disrupción endocrina en Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2019).

Este video describe un ensayo de alimentación para moscas de la fruta en el que se utiliza alimento coloreado para monitorear la alimentación y el efecto que los compuestos añadidos pueden tener en la actividad de alimentación. El protocolo de ejemplo prueba los efectos de varias sustancias químicas disruptoras endocrinas (EDC).

Protocolo

Este protocolo es un extracto de Bovier et al., Methods to Test Endocrine Disruption in Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2019).

1. Ensayo de alimentación

NOTA: Se recomienda este ensayo para probar si la presencia del EDC seleccionado en el medio podría afectar la alimentación de las moscas.

1. Coloque 15 moscas jóvenes en viales que contengan medio de harina de maíz (CM) suplementado con diferentes concentraciones del EDC seleccionado y un alimento colorante. Permita que las moscas se alimenten del medio durante 1 día.
   NOTA: Por ejemplo, use colorante rojo n.º 40 (1 mg/mL).
2. Coloque 15 moscas jóvenes en viales que contengan CM suplementado con el solvente solo y un alimento colorante para el control. Permita que las moscas se alimenten del medio durante 1 día.
3. Anestesiar individualmente cada grupo de moscas con éter.
   1. Transfiera las moscas de cada grupo a un recipiente de vidrio cilíndrico (eterizador) con un embudo insertado en el extremo abierto, invirtiendo el frasco sobre el embudo y golpeando suavemente los dos recipientes para hacer que las moscas caigan en el eterizado>NOTA: El embudo evitará que salgan del eterizador.
   2. Knock Flyes Down golpeando suavemente el etherizer sobre una superficie blanda, como una alfombrilla de ratón, y reemplace rápidamente el embudo con un tapón de algodón y gasa empapado en éter.
   3. Espere aproximadamente 1 minuto hasta que las moscas caigan al fondo y dejen de moverse.
      NOTA: No excedas el tiempo o las moscas morirán.
4. Coloque moscas inmovilizadas bajo un microscopio estereoscópico y compare la coloración abdominal de cada grupo de tratamiento con respecto al grupo de control.

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
17α-etinilestradiol	sigma	E4876-1G
Agar para medio de Drosophila	BIOSIGMA	789148
Bisfenol A	sigma	239658-50G
Bisfenol AF	sigma	90477-100MG
harina de maíz	CA' BIANCA
Éter dietílico	sigma
Viales de Drosophila	BIOSIGMA	789008	25 mm x 95 mm
Viales de Drosophila	BIOSIGMA	789009	29 mm x 95 mm
Viales de Drosophila	Kaltek	Artículo 187	22 mm x 63 mm
etanol	FLUKA	Año 2860
Eterizador	Artesanía		Recipiente de vidrio cilíndrico con tapón de algodón
Batidora de mano Pimmy	Ariete		robot de cocina
Levadura de éxito instantáneo	ESKA		Levadura en polvo
Tinte rojo n.º 40	sigma	Año 16035
Microscopio estereoscópico con luces LED	Leica		S4E