Inclusión de cabezas adultas de Drosophila en parafina: preparación de tejido para histología

En este artículo

Resumen

Fuente: Sunderhaus, E. R., Kretzschmar, D. Histología de masas para cuantificar la neurodegeneración en Drosophila . J. Vis. Exp. (2016).

Este video describe cómo incrustar cabezas de Drosophila en parafina utilizando el método del collar, una técnica que prepara las cabezas de mosca para el corte en serie. Las secciones de parafina se utilizan para los exámenes histológicos de la anatomía del cerebro y para la evaluación de la neurodegeneración. El protocolo presentado demuestra cómo se pueden procesar múltiples moscas en una preparación, lo que aumenta la eficiencia del tiempo y minimiza los artefactos experimentales.

Protocolo

Este protocolo es un extracto de Sunderhaus y Kretzschmar, Histología de masas para cuantificar la neurodegeneración en Drosophila, J. Vis. Exp. (2016).

1. Fijación de la cabeza en collares e incrustación en parafina

NOTA: Todos los pasos del proceso de fijación deben realizarse en una campana extractora. El metilbenzoato, aunque no representa un riesgo para la salud, tiene un olor muy distintivo, que puede ser abrumador si no se maneja en una campana extractora.

Antes de anestesiar las moscas, prepare 50 mL de soluc....

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Resultados

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Figura 1: Secciones seriadas de parafina. A) Utilizando el método del collar, las moscas experimentales y de control pueden procesarse como una sola muestra enhebrándolas en un collar. Las moscas sine oculis sin ojos se insertan para orientarse (flechas). B) Esquema que muestre la orientación de las cabezas de mosca en el collar. C) En esta imagen, las secciones.......