El ensayo CApillary FEeder (CAFE): un método para rastrear el consumo y la preferencia de alimentos en Drosophila

Resumen

Fuente: Diegelmann, S., et al. El ensayo CApillary FEeder mide la ingesta de alimentos en Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2017).

Este video describe el ensayo CApillary FEeder, o CAFE, un método conductual que mide la ingesta de alimentos y la preferencia de las moscas de la fruta sin restricciones. El protocolo presentado muestra cómo realizar el ensayo con una evaporación mínima de los capilares llenos de líquido utilizados para administrar el alimento y realizar un seguimiento de su ingesta.

Protocolo

Este protocolo es un extracto de Diegelmann et al., The CApillary FEeder Assay Food Intake in Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2017).

1. Montaje y realización del ensayo FEeder CApillar

1. Si no es necesario el ayuno, transfiera las moscas experimentales al ensayo mediante golpecitos o sopletes. Asegúrese de incluir tres viales de control sin moscas para cuantificar la evaporación.
2. Retire con cuidado la punta de una pipeta (volumen de 2 a 20 μL) que está cerrando una de las aberturas exteriores e inserte un capilar de vidrio lleno, con el extremo inferior primero. Asegure el capilar coloca....

Resultados

Figura 1: Ensayo de la FEeder de Drosophila melanogaster CApillary. A) El ensayo de alimentación con moscas. El papel de filtro humedecido proporciona agua en el fondo del vial. Durante el experimento se proporcionan cuatro capilares (alimentos de color rojo y azul en capilares opuestos). Tenga en cuenta que los capilares están asegurados en su posición por una segunda punta de pipeta, y las pos.......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Viales (cría)	Greiner Bio-One	960177	www.greinerbioone.com
Viales (ensayo CAFE)	Greiner Bio-One	217101	www.greinerbioone.com
Ensayo Lid-CAFE	taller	–	–
Caja de plástico, pared baja	Plastime	Artículo 353	www.plastime.it
Tapa para la caja de plástico	taller	–	–
Capilares	BLAUBRAND	REF 7087 07	www.brand.de
Puntas de pipeta	Greiner Bio-One	771290	www.greinerbioone.com
Círculos de papel de filtro	Whatman	10 311 804	www.sigmaaldrich.com
D(+)-Sacarosa	AppliChem	57-50-1	www.applichem.com
Absoluto de etanol	Productos químicos de VWR	20.821.330	www.vwr.com
Colorante alimentario (rojo, E124)	Diversión en la espalda	10027	www.backfun.de
Colorante alimentario (azul, E133)	Diversión en la espalda	10030	www.backfun.de
Solución jabonosa (CVK 8)	CVH	103220	www.cvh.de
Calibrador digital	GARANT	412.616	www.hoffmann-group.com
Viales (cría)			Altura 9,8 cm, diámetro 4,8 cm
Viales (ensayo CAFE)			Altura 8 cm, diámetro 3,3 cm
Ensayo Lid-CAFE			Producido en taller universitario, dibujo técnico suministrado Por favor, haga clic aquí para descargar este archivo.
Caja de plástico, pared baja			Se hizo una incrustación de rejilla de plástico a medida para 8 x 10 posiciones de vial
Tapa para la caja de plástico			Dimensiones (37 x 29 x 18 cm)
Capilares			Norma DIN ISO 7550, directriz IVD 98/79 EG, extremos pulidos
Puntas de pipeta			Las pipetas para el círculo exterior se cortan de acuerdo con la tapa
Círculos de papel de filtro			El diámetro de 45 mm funciona bien si se pliega para los viales utilizados
D(+)-Sacarosa			No es dañino
Absoluto de etanol			Líquidos y vapores altamente inflamables
Colorante alimentario (rojo, E124)			No se indica
Colorante alimentario (azul, E133)			No se indica
Solución jabonosa (CVK 8)			Jabón de olor neutro
Calibrador digital
Comida estándar para moscas			(para 20 L)
agar-agar			160 g
Levadura de cerveza			299,33 g
harina de maíz			1.200 g
melaza			1.6 L
Ácido propiónico			57.3 mL
Nipagin 30%			160 mL