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Artículo de método

Disección de glándulas linfáticas larales: aislamiento del órgano productor de hemocitos de Drosophila

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30 de abril de 2023

En este artículo

Resumen

Fuente: Reimels, T. A. y Pfleger, C. M. Métodos para examinar la glándula linfática y los hemocitos en larvas de Drosophila. J. Vis. Exp. (2016).

Este video describe la glándula linfática Drosophila, el sitio principal de hematopoyesis en la larva de mosca, y muestra un ejemplo de protocolo para diseccionar y montar el órgano para inmunohistoquímica e imágenes fluorescentes.

Protocolo

Este protocolo es un extracto de Reimels y Pfleger, Métodos para examinar la glándula linfática y los hemocitos en larvas de Drosophila, J. Vis. Exp. (2016).

1. Inmunohistoquímica de la glándula linfática larvaria

NOTA: La glándula linfática se encuentra aproximadamente a un tercio de la longitud del extremo anterior de una larva, ligeramente por debajo del cerebro en el lado dorsal. (Vea la flecha en Figura 1B.) La glándula linfática flanquea el vaso dorsal y se disecciona más fácilmente adherida a los ganchos bucales o ....

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Resultados

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Figura 1: Melanización in vivo de células cristalinas. A) Las larvas se colocaron individualmente en tubos de PCR antes del calentamiento. Las flechas rojas indican larvas que no están en el fondo de los tubos. B) Un patrón típico de melanización de células cristalinas después del calentamiento, que a veces revela la glándula linfática (flecha; se muestra el lado dorsal, la part.......

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Tabletas PBSMP Biomedicals2810305
plato de disecciónCorning7220-85
tubo de microcentrífugaDenvilleC2170
Almohadilla de disección de silicona, fabricada con el kit Sylgard 184Krayden (distribuido a través de Fisher)NC9644388 (número de catálogo de Fisher)Fabricado en placa de Petri mezclando los componentes del kit de elastómero Sylgard de acuerdo con las instrucciones del fabricante.
Microscopio estereoscópicoMorrell Instruments (distribuidor de Nikon)MNA42000, MMA36300Modelos Nikon SMZ1000 y SMZ645
toallita de pañueloVWR82003-820
fórcepsCiencias de la Microscopía Electrónica72700-DZ
Pipeta P200Eppendorf3120000054
FormaldehídopescadorBP531-500
TritónpescadorBP151-500
Preadolescente 20pescadorBP337-500
albúmina sérica bovinaBiológicos de las Montañas RocosasBSA-BSH-01K
Suero de cabra normalsigmaG9023-10ML
Suero de burro normalsigmaD9663-10ML
Etanol de 200 gradosVWRV1001
Galato de N-propiloMP Biomedicals102747
glicerolVWREM-4750
DAPI (4',6-diamidino-2-fenilindol)pescador62248
Cubreobjetos de microscopio, 18 mm circularespescador12-545-100
portaobjetos de microscopio de vidriopescador22-034-980
Placa de 24 pocillosCorning351147
pipeta de transferencia desechablepescador13-711-9AM
Microscopio de fluorescenciaZeissGenerador de imágenes Axio.Z1

Etiquetas

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