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Drosophila Recolección de huevos y descorionación: un método para eliminar la capa de huevos más externa

30 de abril de 2023

En este artículo

Resumen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Fuente: Koyle, M. L., et al. Criando la mosca de la fruta Drosophila melanogaster en condiciones axénicas y gnotobióticas. J. Vis. Exp. (2016).

El embrión de Drosophila está rodeado por membranas externas protectoras. Para acceder al embrión, a menudo se extirpa el corion, la más externa de las membranas. Este video describe un método comúnmente utilizado de decorionación usando hipoclorito de sodio. El protocolo de ejemplo muestra el procedimiento empleando técnicas estériles necesarias para la cría de animales axénicos o gnotobióticos.

Protocolo

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Este protocolo es un extracto de Koyle et al., Criando la mosca de la fruta Drosophila melanogaster bajo condiciones axénicas y gnotobióticas, J. Vis. Exp.(2016).

1. Preparar jaulas para poner huevos

  1. Haga platos de agar jugo de uva calentando en el microondas 100 ml de agua, 10 g de levadura de cerveza, 10 g de glucosa y 1 g de agar. Llevar a ebullición 3 veces en el paso 1.1 y añadir 10 g de concentrado de zumo de uva congelado para aumentar la visibilidad de los huevos en la placa de agar.
  2. Cuando el agar se haya enfriado a 55 °C, vierta 20 ml en placas de Petri de 100 mm y deje que se solid....

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Levadura de cervezaMP Biomedicals, LLC.903312http://www.mpbio.com/product.php?pid=02903312
glucosaSigma Aldrich158968-3KGhttp://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/158968?lang=en®ion=US
agar-agarFisher--Laboratorio Científicofly802010https://www.fishersci.com/shop/products/drosophila-agar-8-100mesh-10kg/nc9349177
Concentrado de jugo de uva 100% de Welch'sWalmart u otra tienda de comestibles9116196http://www.walmart.com/ip/Welch-s-Frozen-100-Grape-Juice-Concentrate-11.5-oz/10804406
Jaula: Contenedor redondo translúcido de 32 oz para delicatessenTienda Webstaurant999L5032Yhttp://www.webstaurantstore.com/newspring-delitainer-sd5032y-32-oz-translucent-round-deli-container-24-pack/999L5032Y.html
Tapa redonda translúcida del contenedor de delicatessenTienda Webstaurant999YNL500http://www.webstaurantstore.com/newspring-delitainer-ynl500-translucent-round-deli-container-lid-60-pack/999YNL500.html
Botellas de stockGenesee Científico32-130https://geneseesci.com/shop-online/product-details/?product=32-130
Droso-TaponesGenesee Científico49-101https://geneseesci.com/shop-online/product-details/?product=49-101
Malla de nailonGenesee Científico57-102https://geneseesci.com/shop-online/product-details/715/?product=57-102
Casquillo de plásticoHome Depot (en inglés)100404002http://www.homedepot.com/p/Carlon-1-in-Non-Metallic-Terminal-Adapter-E943FR-CTN/100404002
Tapa de casquillo de plásticoHome Depot (en inglés)100153897http://www.homedepot.com/p/1-1-4- Buje-Aislado-Plástico-Rígido-2-Pack-27529/100153897
Taza de espécimenSocios de MedSupplyK01-207067http://www.medsupplypartners.com/covidien-specimen-containers.html
Repetidor M4Eppendorf4982000322https://online-shop.eppendorf.us/US-en/Manual-Liquid-Handling-44563/Dispensers--Burettes-44566/Repeater-M4-PF-44619.html
Tubos de centrífuga de 50 mlTubos de centrífuga TrueLineTR2003https://www.lpsinc.com/Catalog4.asp?catalog_nu=TR2003
Cajas de alimentosCientífico de EE. UUTeléfono 2316-5001http://www.usascientific.com/search.aspx?find=2316-5001
Matriz de lisis D a granelMP Biomedicals, LLC.116540434http://www.mpbio.com/search.php?q=6540-434&s=Search
Puntas de pipeta con filtro, 300 μlCientífico de EE. UU1120-9810http://www.usascientific.com/search.aspx?find=1120-9810
Placas de PetriVenta de productos de laboratorioM089303https://www.lpsinc.com/Catalog4.asp?catalog_nu=M089303
etanolLaboratorios Decon, INC.Artículo 2701http://www.deconlabs.com/products.php?ID=88
pincelWalmart5133http://www.walmart.com/ip/Chenille-Kraft-5133-Acrylic-Handled-Brush-Set-Assorted-Sizes-colors-8-Brushes-set/41446005
fórcepspescador08-882https://www.fishersci.com/shop/products/fisherbrand-medium-pointed-forceps-3/p-128693
Lejía de uso doméstico (6-8% de hipoclorito)Walmart550646751http://www.walmart.com/ip/Clorox-Concentrated-Regular-Bleach-121-fl-oz/21618295
Peptona universalGenesee Científico20-260https://geneseesci.com/shop-online/product-details/?product=20-260
Extracto de levadura Fisher CientíficoBP1422-500https://www.fishersci.com/shop/products/fisher-bioreagents-microbiology-media-additives-yeast-extract-3/bp1422500?matchedCatNo=BP1422500
Fosfato dipotásicoSigma AldrichP3786-1KGhttp://www.sigmaaldrich.com/catalog/
Citrato de amonioSigma Aldrich25102-500ghttp://www.sigmaaldrich.com/catalog/
Acetato de sodioVWR97061-994https://us.vwr.com/store/catalog/product.jsp?catalog_number=97061-994
Sulfato de magnesioFisher CientíficoM63-500https://www.fishersci.com/shop/products/magnesium-sulfate-heptahydrate-crystalline-certified-acs-fisher-chemical-3/m63500?matchedCatNo=M63500
Sulfato de manganesoSigma Aldrich10034-96-5http://www.sigmaaldrich.com/catalog/
Polvo MRSSigma Aldrich69966-500Ghttp://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sial/69966?lang=en®ion=US
Lector de placas de 96 pocillosBioTek (Época)Nahttp://www.biotek.com/products/microplate_detection/
Tubos de centrífuga de 1,7 mlCientífico de EE. UU1615-5500http://www.usascientific.com/search.aspx?find=1615-5500
Puntas de pipeta con filtro, 1.000 μlCientífico de EE. UU1122-1830http://www.usascientific.com/search.aspx?find=1122-1830
Placas de 96 pocillosGreiner Bio-One655101https://shop.gbo.com/en/usa/articles/
Abalorios de cerámicaMP Biomedicals, LLC.6540-434http://www.mpbio.com/product.php?pid=116540434
Homogeneizador de tejidosMP Biomedicals, LLC.116004500http://www.mpbio.com/product.php?pid=116004500
Gabinete de bioseguridad de clase 1Termo CientíficoModelo 1395http://www.thermoscientific.com/en/product/1300-series-class-ii-type-a2-biological-safety-cabinet-packages.html
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