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Conteo de Unidades Formadoras de Colonias (UFC): Cuantificación de Bacterias a partir de Cuerpos de Moscas

30 de abril de 2023

En este artículo

Resumen

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Fuente: Koyle, M. L., et al. Criando la mosca de la fruta y Drosophila melanogaster en condiciones axénicas y gnotobióticas. J. Vis. Exp. (2016).

La microbiota de Drosophila influye en el desarrollo, la inmunidad y la fisiología del animal. Este video describe un método para cuantificar las bacterias de las moscas mediante la determinación de las unidades formadoras de colonias a partir de preparaciones de cuerpo entero. El protocolo presentado muestra la técnica con moscas, criadas en condiciones gnotobióticas utilizando cuatro especies bacterianas.

Protocolo

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Este protocolo es un extracto de Koyle et al., Criando la mosca de la fruta Drosophila melanogaster bajo condiciones axénicas y gnotobióticas, J. Vis. Exp. (2016).

1. Huevos decorionados y transferencia a dieta estéril

  1. Prepare la cabina de bioseguridad rociando el interior (incluidos los lados) con etanol al 70%. Limpie la parte inferior con un pañuelo de laboratorio y esterilice la capucha con luz ultravioleta durante ~ 15 minutos. Esterilice todos los suministros no biológicos (recipientes de muestras, pincel, pinzas, contenedor de desechos, 400 ml de agua esterilizada y 100 ml de hipoclorito de sodi....

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Resultados

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Archivo de código suplementario: Ejemplos de cálculos. Por favor, haga clic aquí para ver este archivo (haga clic con el botón derecho para descargar).

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Levadura de cervezaMP Biomedicals, LLC.903312
glucosaSigma Aldrich158968-3KG
agar-agarFisher--Laboratorio Científicofly802010
Concentrado de jugo de uva 100% de Welch'sWalmart u otra tienda de comestibles9116196
Jaula: Contenedor redondo translúcido de 32 oz para delicatessenTienda Webstaurant999L5032Y
Tapa redonda translúcida del contenedor de delicatessenTienda Webstaurant999YNL500
Botellas de stockGenesee Científico32-130
Droso-TaponesGenesee Científico49-101
Malla de nailonGenesee Científico57-102
Casquillo de plásticoHome Depot (en inglés)100404002
Tapa de casquillo de plásticoHome Depot (en inglés)100153897
Taza de espécimenSocios de MedSupplyK01-207067
Repetidor M4Eppendorf4982000322
Tubos de centrífuga de 50 mlTubos de centrífuga TrueLineTR2003
Cajas de alimentosCientífico de EE. UUTeléfono 2316-5001
Matriz de lisis D a granelMP Biomedicals, LLC.116540434
Puntas de pipeta con filtro, 300 μlCientífico de EE. UU1120-9810
Placas de PetriVenta de productos de laboratorioM089303
etanolLaboratorios Decon, INC.Artículo 2701
pincelWalmart5133
fórcepspescador08-882
Lejía de uso doméstico (6-8% de hipoclorito)Walmart550646751
Peptona universalGenesee Científico20-260
Extracto de levaduraFisher CientíficoBP1422-500
Fosfato dipotásicoSigma AldrichP3786-1KG
Citrato de amonioSigma Aldrich25102-500g
Acetato de sodioVWR97061-994
Sulfato de magnesioFisher CientíficoM63-500
Sulfato de manganesoSigma Aldrich10034-96-5
Polvo MRSSigma Aldrich69966-500G
Lector de placas de 96 pocillosBioTek (Época)Na
Tubos de centrífuga de 1,7 mlCientífico de EE. UU1615-5500
Puntas de pipeta con filtro, 1.000 μlCientífico de EE. UU1122-1830
Placas de 96 pocillosGreiner Bio-One655101
Abalorios de cerámicaMP Biomedicals, LLC.6540-434
Homogeneizador de tejidosMP Biomedicals, LLC.116004500
Gabinete de bioseguridad de clase 1Termo CientíficoModelo 1395
. . . .

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Etiquetas

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