Seguimiento de moscas que caminan libremente: un método para evaluar la locomoción en Drosophila

Resumen

Fuente: Sun, M. y Chen, L. L. Un método novedoso para modelar la encefalopatía traumática crónica en Drosophila. J. Vis. Exp. (2017).

Este video describe cómo rastrear moscas que caminan libremente para evaluar su capacidad general de locomoción. El protocolo presentado demuestra la configuración del ensayo y el análisis de datos mediante software de seguimiento de vídeo.

Protocolo

Este protocolo es un extracto de Sun y Chen, Un método novedoso para modelar la encefalopatía traumática crónica en Drosophila, J. Vis. Exp. (2017).

1. Seguimiento de movimiento asistido por video

1. Llene una placa de Petri de 6 cm de diámetro con elastómero de silicona transparente para hacer la arena de seguimiento. Deje un espacio de 3 mm entre la silicona y la tapa del plato para permitir que las moscas caminen libremente pero no vuelen.
2. Anestesia a cuatro moscas del grupo falso o tratado cada vez y colócalas en la arena. Dejar las moscas a 22 °C durante 1 h.
3. Coloque una cámara de dispositivo de carga acoplada (CCD) sobre las arenas y grabe durante 5 minutos.
4. Analice las trayectorias de movimiento registradas utilizando el software Ctrax (disponible gratuitamente en Caltech). Exporte los datos rastreados en un formato compatible con el lenguaje de programación (por ejemplo, Matlab) y analice los datos en función de la distancia recorrida por fotograma. Calcule la distancia media a pie para cada mosca y combínela con todas las demás moscas/grupo registradas para obtener una distancia media acumulada recorrida por la población de archivos del mismo grupo.

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Placas de Petri de 60 mm	Fisher Científico	FB0875713A	Utilizado como arenas de rastreo
Regulador de caudal	Genesee Científico	59-122WC
Pincel fino	Genesee Científico	59-204
Almohadilla para moscas	Genesee Científico	59-114
Elastómero de silicona Sylgard	Dow Corning	4019862
Cámara CCD	Microsoft	HD-5000
Ctrax Rastreador de moscas andantes	Caltech	Ctrax 0.2.11
Caja de herramientas de procesamiento de imágenes de MATLAB	MATLAB	R2015b