$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Este protocolo es un extracto de Trannoy et al., A New Approach that Eliminates Handling for Study Aggression and the "Loser" Effect in Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2015).
1. Experimento conductual
- Realice los experimentos de comportamiento con moscas macho de 6-7 días de edad.
- Inserte divisores de plástico en cada cámara de combate.
- Retire el tapón de algodón del tubo de aislamiento y coloque el tubo debajo de un orificio abierto en el costado del aparato.
- Deje que la mosca ingrese a la cámara de combate por geotaxis negativa, generalmente en unos pocos segundos.
- Cierre la pared deslizante después de que la mosca haya salido del tubo y haya entrado en la cámara.
- Repita el procedimiento para introducir la segunda mosca en la cámara de combate del otro lado del aparato.
- Vuelva a colocar el aparato en la posición de grabación de vídeo iluminada.
- Comience la grabación de video y retire el divisor de plástico para permitir que las moscas interactúen.
- Para experimentos de agresión:
- En estos experimentos, se graban las peleas durante al menos 20 minutos para asegurar la formación de fuertes relaciones de dominancia.
- Después del tiempo deseado, detenga la grabación de video.
- Elimine las moscas de las cámaras de combate invirtiendo el procedimiento descrito anteriormente.
- Lave a fondo el aparato de comportamiento con detergente suave y agua después de cada uso y enjuague.
- Para experimentos de efecto "perdedor":
NOTA: En estos experimentos, las primeras peleas se consideran como la fase de condicionamiento y las segundas peleas como la fase de prueba. El período de descanso entre peleas puede diferir, pero 10 minutos permite la formación de un fuerte efecto de "perdedor".
- Siga el procedimiento descrito anteriormente para realizar una primera pelea.
- PASO CRÍTICO: Para inducir la formación de una mentalidad de "perdedor", asegúrese de que las primeras peleas duren al menos 20 minutos para establecer relaciones de dominio sólidas. Después de 20 minutos, vuelva a insertar el divisor de plástico en las cámaras de combate para separar las moscas.
- Después de un período de descanso de 10 minutos, retire suavemente el divisor de plástico para permitir que las moscas interactúen para segundas peleas.
- Al final de la segunda pelea de 20 minutos, detenga la grabación de video.
- Retire las moscas de las cámaras de comportamiento como se indicó anteriormente.
- Una vez más, limpie a fondo el aparato conductual.