Ensayo de gradiente de temperatura: un método para probar la preferencia de temperatura en larvas de Drosophila

Abstract

Fuente: Liu, J., et al. A Ensayo de gradiente de temperatura para determinar las preferencias térmicas de las larvas de Drosophila. J. Vis. Exp. (2018).

Las moscas de la fruta Drosophila pueden distinguir pequeños cambios de temperatura y, por lo tanto, seleccionar ambientes con condiciones térmicas favorables. Este video describe un ensayo de comportamiento que prueba la preferencia de temperatura de las larvas de Drosophila en un gradiente térmico lineal.

Protocol

Este protocolo es un extracto de Liu et al. Un ensayo de gradiente de temperatura para determinar las preferencias térmicas de las larvas de Drosophila, J. Vis. Exp. (2018).

1. Configuración del gradiente de temperatura

1. Preparación de gradiente unidireccional
   1. Para crear un ambiente húmedo durante los ensayos, coloque los dos bloques de aluminio conectados a dos baños de agua sobre toallas de papel húmedas, separadas por 10 cm (Figura 1A).
   2. Encienda los dos baños de agua ~ 2 h antes de iniciar el ensayo para permitir suficiente tiempo ....

Results

Figura 1: Configuraciones de ensayos de gradiente simple y bidireccional. (A) Configuración de gradiente unidireccional con dos placas de ensayo de aluminio en dos bloques de aluminio. Las temperaturas de los bloques de aluminio se controlan mediante la circulación de agua de dos baños de agua. (B) La disposición de los tres bloques de aluminio, baños de agua y una placa de aluminio (250.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Aparato de ensayo de gradiente
PolyScience 9106, Baño Circulante Refrigerado/Calentado de 6L	Thomas Científico	9106	Este modelo está descatalogado. Los modelos de reemplazo actualizados incluyen: 1186R00 y 1197U04 para 120 V, 60 Hz, o 1184L08 y 1197U04 para 240 V, 50 Hz.
Placa de ensayo de aluminio (para gradiente direccional simple)			Tamaño exterior: 14 x 10,1 x 0,9 cm, tamaño interior: 12,9 x 8,7 x 0,8 cm, anodizado negro.
Placa de aluminio (para gradiente bidireccional)			25 x 22 x 0,2 cm, anodizado negro.
Bloque de aluminio			Tamaño exterior: 25,5 x 5 x 1,4 cm, los parámetros de los canales internos se muestran en la Figura 1D.
Conector para bloques y tubos de aluminio	McMaster-Carr	91355K82
Tubo de silicona sanitario Tygon	Tygon	57296	1/4" de diámetro interno x 3/8" de diámetro exterior x 1/16" de pared
nombre	compañía	Número de catálogo	Comentarios
Artículos y reactivos para ensayos
pilón	Científico de EE. UU	Año 17361	Maja para tubos de microcentrífuga de 1,5 mL
termómetro	chiripa	51II
termopar	chiripa	Tipo K
Tapa de microplaca universal	Corning	6980A77
Plato de 35 mm	Corning	9380D40
Cinta de etiquetado (para degradado bidireccional)	Fisher Científico	15-951	Cinta de etiquetado Fisherbrand de 2 pulgadas x 14 yardas
agarosa	Invitrogen	16500500	Prepare la solución al 1%
sacarosa	sigma	S0389-5KG	Prepare la solución al 18% justo antes de comenzar el ensayo
Pincel	Fisher Científico	Año 11860
Tubos de centrífuga de 50 mL	Denville	C1062-P
Scoopula	Fisher Científico	14-357Q
Frasco redondo de boca ancha de 500 ml	pyrex	1395-500
Filtro de células (poro de 300 mm)	PluriSelect	43-50300	Elemento opcional para el lavado de larvas
Caja de cartón (bandeja de viales)	Genesee Científico	FS32-124