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Ensayo de habituación al tacto: un método para estudiar el aprendizaje no asociativo en C. elegans

30 de abril de 2023

En este artículo

Resumen

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Fuente: Mersha, M. D., et al. Consecuencias conductuales y reproductivas a largo plazo de la exposición embrionaria a tóxicos en dosis bajas. J. Vis. Exp. (2018).

Este video presenta el ensayo de habituación táctil, un método conductual de C. elegans para evaluar la mecanosensación y cuantificar el tiempo hasta la habituación.

Protocolo

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El siguiente protocolo es un extracto de Mersha et al. Consecuencias conductuales y reproductivas a largo plazo de la exposición embrionaria a tóxicos en dosis bajas, J. Vis. Exp. (2018)

  1. Ensayo de habituación al tacto anterior
    1. Transfiera aproximadamente 10 gusanos adultos jóvenes sincronizados a nuevas placas NGM sin semillas utilizando una púa de alambre de platino de 30 G esterilizada contra el fuego. Deje las lombrices sin molestar durante 5 minutos para darles tiempo de aclimatarse a la nueva placa.
    2. Para la respuesta de habituación, use un pelo de ceja unido al extremo de una brocheta de madera o un palillo de dientes, y esterilicelo sumergiéndolo en etanol al 70%. Limpie con un pañuelo limpio y sin pelusa y espere 1 minuto para que el etanol se evapore. Toque suavemente el gusano en la cabeza (anterior del bulbo faríngeo) usando el vello de la ceja. Repita los toques, dejando 10 segundos entre toques para permitir que el gusano se recupere.
    3. Continúe tocando (permitiendo intervalos entre estímulos de 10 s) hasta que el gusano ya no se mueva hacia atrás. En este punto, el gusano se ha habituado al estímulo. Registre el número+ber de toques necesarios para que el gusano se habitúe.
    4. Analice la diferencia entre las tasas medias de habituación de los controles tratados y no tratados utilizando ANOVA de un factor seguido de la prueba post hoc de Tukey.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
EtOHSigma-Aldrich64-17-5
N2 (C. elegans de tipo salvaje) gusanosCGCRepositorio en la Universidad de Minnesota
Pico de alambre de platinoGenesee Científico59-AWP
Placas de Petripescador07-202-011
Microscopio de disecciónAmScope (en inglés)SM-2TYY

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