Irradiación UV: un método para integrar matrices extracromosómicas

Resumen

Fuente: Mariol, M. C et al. Un protocolo rápido para la integración de matrices extracromosómicas con alta tasa de transmisión en el genoma de C. elegans.J. Vis. Exp.(2013).

La microinyección de transgenes generalmente resulta en cepas de C. elegans con grandes matrices extracromosómicas, que resultan en una expresión y transmisión variables del transgén. La irradiación UV puede inducir la integración cromosómica de la matriz y una transmisión transgénica más estable.

Protocolo

Este protocolo es un extracto de Mariol et al, Un Protocolo Rápido para la Integración de Matrices Extracromosómicas con Alta Tasa de Transmisión en el Genoma de C. elegans, J. Vis. Exp.(2013).

1. Irradiación UV y recuperación de gusanos transgénicos

1. Irradiación de gusanos:
   1. Escoja de 30 a 100 animales L4 transgénicos fluorescentes en placas de cultivo separadas (15 a 20 animales por placa).
   2. Coloque las placas, sin las ta....

Resultados

Tabla 1. Comparación de los protocolos estándar y mejorados para la integración de matrices extracromosómicas en el genoma de C. elegans.Dos transgenes no integrados que transmiten aproximadamente a la misma frecuencia se integraron utilizando el protocolo estándar o mejorado. La principal diferencia radica en que en el protocolo estándar se realiza un cribado de.......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
U.V. reticulante	Fischer Scientific		Longitud de onda 254 nm
Microscopio SteREO Discovery V8	Carl Zeiss, Inc.
Placas de Petri, 60 mm	Cml	BPS55E6
Alambre de platino 0.25 mm	Alfa Aesar	04/06/7440	Para hacer una pica para gusanos