Inyección ortotópica: implantación de células cancerosas específicas de tejido en un ratón adulto

Resumen

Fuente: Katsuta, E., et al. Generación de un modelo de cáncer de mama metastásico ortotópico murino y realización de mastectomía radical murina.J. Vis. Exp.(2018).

El video muestra la técnica de inoculación ortotópica del cáncer de mama en un modelo de ratón. Esta técnica produce una alta tasa de tumorigénesis con menos variabilidad en el tamaño y la forma del tumor en comparación con la inyección subcutánea o no quirúrgica.

Protocolo

1. Preparación de células (para 10 ratones)

NOTA: Las células deben inocularse dentro de 1 h después de ser separadas de la placa para evitar la disminución de la viabilidad celular. Específicamente, la suspensión celular debe mezclarse con la mezcla de proteínas gelatinosas dentro de los 15 minutos posteriores a separar las células de la placa para mantener su viabilidad.

1. Cultivo de células 4T1-luc2, una línea celular de adenocarcinoma mamario de ratón que expresa luciferasa, en medio RPMI 1640 con FBS al 10% en una incubadora humidificada a 37 °C con CO₂ al 5%.
2. Lavar las células 4T1-luc2 a....

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Micro tijeras de disección	Roboz	RS-5983	Para la inoculación de células cancerosas y la mastectomía
5-0 Suturas de seda	mirar	774B F
Instituto Conmemorativo de Roswell Park 1640	Gibco	11875093	Para cultivo celular
Suero Fetal Bovino	Gibco	10437028	Para cultivo celular
Tripsina-EDTA (0,25%)	Gibco	25200056	Para cultivo celular
Esterilizante seco (Germinator 500)	Braintree Científico	GER 5287-120V	Para la inoculación de células cancerosas y la mastectomía
Portaagujas	Roboz	RS-7830	Para la inoculación de células cancerosas y la mastectomía
Pinzas Adson	Roboz	RS-5233	Para la inoculación de células cancerosas y la mastectomía
clíper	Wahl	9908-717	Para la inoculación de células cancerosas y la mastectomía
Matrigel	Corning	354234	Para la inoculación de células cancerosas