Mastectomía radical: extirpación quirúrgica de toda la glándula mamaria de un ratón para estudiar la progresión del cáncer

Resumen

Fuente: Katsuta, E., et al. Generación de un modelo de cáncer de mama metastásico ortotópico murino y realización de mastectomía radical murina. J. Vis. Exp (2018).

Este video describe una técnica de mastectomía radical, que se utiliza para la extirpación quirúrgica de toda la glándula mamaria de un ratón para estudiar la progresión del cáncer.

Protocolo

1. Mastectomía

NOTA: El momento de la mastectomía es muy importante. Si se hace demasiado pronto, no se produce metástasis pulmonar. Si se hace demasiado tarde, el tumor primario ha invadido los vasos sanguíneos principales, lo que dificulta una resección oncológica completa. Por lo tanto, se probaron múltiples puntos de tiempo para la mastectomía a fin de determinar qué punto de tiempo produjo el equilibrio adecuado en la espera de metástasis antes de que la resección se volviera demasiado difícil. Después de hacerlo en más de 50 experimentos con ratones, se demostró que la mastectomía a los 8 días después de la inoculación de las células cancerosas (o cuando el tamaño del tumor alcanza los 5 mm) era el punto de tiempo ideal para lograr ese equilibrio.

1. Anestesiar a un ratón con isoflurano al 2-4% y flujo de oxígeno de 0,2 L/min hasta que los ratones respiren tranquilamente (2-3 min) e inyectar 0,05 mg/kg de buprenorfina en su hombro por vía subcutánea.
2. Sujete las extremidades del ratón con cinta de laboratorio y esterilice su piel con clorhexidina, yodo y etanol al 75%, usando hisopos de algodón.
3. Hacer una incisión en la piel de 5 mm a 2 mm a la izquierda de la cicatriz quirúrgica que se hizo en la inoculación inicial de las células cancerosas, utilizando las tijeras de microdisección. Extienda la incisión hacia la raíz de la extremidad anterior para extirpar el tumor, la piel, incluida la cicatriz quirúrgica, y la lesión en contacto con el tumor, así como la cuenca de los ganglios linfáticos axilares en la que la mayoría de las veces no existe ningún ganglio linfático visible en el momento de la mastectomía. Asegúrate de no dañar la vena axilar.
4. Cierre los defectos de la piel mediante suturas, utilizando suturas estériles 5-0 no absorbibles en forma de "Y".
5. Regrese el ratón a una jaula limpia y vigile hasta que se haya recuperado y se mueva libremente (después de ~ 1-2 min). Si un animal no parece gozar de buena salud dentro de las 24 horas posteriores a la cirugía, administre buprenorfina (0,2 mg/kg).
6. Retirar las suturas bajo anestesia (con isoflurano al 2-4% y flujo de oxígeno de 0,2 L/min) 7 días después de la cirugía.

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Micro tijeras de disección	Roboz	RS-5983	Para la inoculación de células cancerosas y la mastectomía
Pinzas Adson	Roboz	RS-5233	Para la inoculación de células cancerosas y la mastectomía
Portaagujas	Roboz	RS-7830	Para la inoculación de células cancerosas y la mastectomía
5-0 Suturas de seda	mirar	774B	Para la inoculación de células cancerosas y la mastectomía
Esterilizante seco (Germinator 500)	Braintree Científico	GER 5287-120V	Para la inoculación de células cancerosas y la mastectomía
clíper	Wahl	9908-717	Para la inoculación de células cancerosas y la mastectomía