zPDX-Análisis de invasividad: investigación del comportamiento invasivo de células de cáncer metastásico en xenoinjertos de embriones de pez cebra

Resumen

Fuente: Ren, J. et al. Comportamiento invasivo de las células de cáncer de mama humano en peces cebra embrionarios. J. Vis. Exp. (2017).

Este video describe un método de microinyección para la administración de células de cáncer de mama en el espacio perivitelino de embriones transgénicos de pez cebra. Después de la incubación, visualizamos el embrión bajo un microscopio fluorescente para observar la invasión, diseminación y metástasis de las células cancerosas.

Protocolo

1. Imagen y análisis del proceso metastásico

1. Recoja varios embriones anestesiados con una pipeta Pasteur de punta ancha y transfiéralos al fondo de vidrio de una placa de poliestireno.
2. Retire el exceso de agua y guarde una cantidad limitada de agua de huevo. Manipule el embrión en su posición con una herramienta de bucle para el cabello y coloque una cubierta encima del vidrio.
3. Utilice un microscopio confocal invertido en combinación con objetivos secos de inmersión en agua o de larga distancia. Coloque el embrión de manera que la región de interés esté lo más cerca posible del objetivo.
4. Realice imágenes inmed....

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Pipeta Pasteur de punta ancha (0,5-20 μL)	Eppendorf	F276456I
Microscopio confocal	Leica	SP5 STED
Microscopio estereoscópico	Leica	MZ16FA
Cepa de pez cebra Tg (fli:EGFP)			Amablemente proporcionado por la Dra. Ewa Snaar Jagalska (Instituto de Biología, Universidad de Leiden, Leiden, Países Bajos)
Plato de poliestireno con fondo de cristal	WillCo	GWST-5040
Microscopio estereoscópico fluorescente	Leica	M165 FC
Tricaína (ácido 3-aminobenzoico)	SigmaAldrich	A-5040