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Todos los procedimientos relacionados con animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado de animales y la junta de revisión veterinaria de JoVE.
1.18Imágenes de PET y TC F-FDG en ratones
>PRECAUCIÓN: Utilice equipo de protección cuando manipule radiactividad. Siga todos los procedimientos reglamentarios aplicables cuando manipule radiactividad.
- Coloque la jaula con los ratones que se van a fotografiar en una cama caliente a 37 °C 1 h antes de la inyección de 18F-FDG para reducir el consumo de grasa parda de 18F-FDG.
nota: El ayuno de los ratones durante 4 a 16 horas puede ayudar a reducir el consumo miocárdico de 18F-FDG.
- Pesa el ratón y registra su peso.
- Anestesiar al ratón con isoflurano al 2 - 3% en oxígeno a 0,5 - 2 L/min durante 2 - 3 min utilizando una cámara de anestesia mantenida a 37 °C. Asegúrese de que el ratón ha sido anestesiado pellizcando el dedo del pie; no se observará ninguna reacción si el ratón ha sido anestesiado. Aplique ungüento oftálmico en los ojos para evitar cualquier sequedad durante la anestesia.
- Diluir 18F-FDG (109 min de vida media radiactiva) en solución salina estéril a una concentración de inyección corregida por caries ajustada de 70 - 75 μCi/100 μL.
nota: Siga la dosis de 18F recomendada por el fabricante del escáner PET para obtener imágenes óptimas del escáner.
- Extraiga 70 - 75 μCi con una jeringa de insulina con una aguja de 28 G, mida la dosis de radiactividad con un calibrador de dosis y registre la medición y el tiempo. Coloque la jeringa en un soporte de jeringa de plomo.
nota: La cantidad de radiactividad de 18F-FDG en cada dosis se mide con un calibrador de dosis, que se calibra contra un material de referencia estándar, como el cesio-137, de acuerdo con los protocolos del fabricante. El tiempo de la lectura también se registra para determinar la corrección de decaimiento.
- Pinche el extremo distal de la cola del ratón y mida la glucosa en sangre del ratón con un glucómetro.
- Calienta la cola durante 1 a 2 minutos con una gasa empapada en agua tibia. Limpie la cola con isopropanol al 70% para dilatar la vena de la cola justo antes de la inyección. Administre 100 μL de 18F-FDG (todo el volumen de la jeringa) con una inyección en bolo a través de la vena lateral de la cola y registre el momento de la inyección. Mida la dosis restante en la jeringa utilizando el calibrador de dosis y registre la medición y el tiempo.
nota: Quedará cierta cantidad de sonda en la jeringa. Se prefiere el uso de jeringas de insulina en lugar de jeringas conectadas a agujas a través de cerraduras Luer debido a la disminución de la cantidad de la dosis atrapada en la jeringa/aguja después de que se ha administrado la inyección.
- Coloque el ratón inyectado en la cámara de anestesia mantenida por debajo de isoflurano al 1,5 - 2% a 37 °C para permitir que la sonda se distribuya a través de la circulación sistémica del ratón durante 1 h antes de la exploración PET.
nota: Podría ser beneficioso vaciar la vejiga antes de la exploración para permitir una visualización más fácil de los tumores implantados en los flancos inferiores del ratón.
- Después de 1 hora, coloque al ratón en una cámara de imágenes bajo anestesia con isoflurano en forma de cono nasal y a 37 °C, y asegure sus extremidades en su lugar con cinta médica en posición supina.
- Coloque la cámara de imágenes en el escáner PET/CT.
- Adquiera las exploraciones PET y CT como se describe en el manual del escáner PET/CT.
nota: Las imágenes PET se adquieren durante 600 s con una ventana de energía de 150 a 650 keV, reconstruidas utilizando la maximización de expectativas de máxima verosimilitud con correcciones para la atenuación de fotones, la normalización del detector y la desintegración de radioisótopos (no se aplicó una corrección de dispersión). Las imágenes de TC se adquieren en modo continuo durante 50 s utilizando una fuente de rayos X de 50 kVp y 200 μA y un detector de panel plano, y se reconstruyen utilizando el algoritmo de Feldkamp.
- Una vez completada la PET/CT, retire el ratón de la cámara de imágenes y permita que se recupere en su jaula.