Injerto de islotes pancreáticos: un método para implantar islotes pancreáticos en la cámara anterior del ojo de ratón para obtener imágenes in vivo

Resumen

Fuente: Nilsson, J.et. al.A Imagen y cuantificación longitudinal in vivo de injertos de islotes pancreáticos humanos y células huésped contribuyentes en la cámara ocular anterior. J. Vis. Exp. (2020).

Este video describe el protocolo para injertar islotes pancreáticos humanos en la cámara anterior del ojo del ratón para monitorear la revascularización de injertos de islotes humanos in vivo. También ayuda a comprender la contribución de las células receptoras frente a las del donante en la promoción de la encapsulación y vascularización del injerto.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado de animales y la junta de revisión veterinaria de Jove

1. Preparación del equipo de trasplante y mesa de cirugía

NOTA: Todas las herramientas quirúrgicas deben esterilizarse en autoclave, y la mesa de cirugía y los instrumentos deben desinfectarse con alcohol al 70%.

1. Conecte un soporte de cabeza estereotáxico a la anestesia a través de una máscara nasal y encienda la almohadilla térmica.
2. Conecte una jeringa Hamilton hermética al gas a un t....

Resultados

Figura 1: Trasplante de islotes pancreáticos a la cámara anterior del ojo.
(a) Configuración del trasplante que muestra al ratón anestesiado fijado en un soporte de cabeza estereotáxico y el ojo expuesto (recuadro) junto a la jeringa Hamilton preparada fijada a la mesa y el microscopio estereoscópico listo para seleccionar islotes de ratón (b) o islotes humanos (.......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Capa de banco limpia
Almohadilla térmica			Ajustado a 37 °C
Generador de imágenes bioluminiscente Ivis Lumina ll	calibrador		Los sistemas alternativos de imágenes bioluminiscentes incluyen In vivo F PRO (Carestream) y Photon Imager (Biospace Lab)
Tijeras de disección
Pinzas de iris (dentadas)
Portaagujas
Jeringa de insulina de 27 G de 0,3 ml	Terumo	T35525M2913