Injerto muscular como estrategia quirúrgica para restaurar el flujo sanguíneo al cerebro del ratón después de un accidente cerebrovascular

Resumen

Fuente: Paro, M. R., et.al. Un modelo para el tratamiento de la encefalomiosinangiosis después de un accidente cerebrovascular inducido por la oclusión de la arteria cerebral media en ratones. J. Vis. Exp. (2022).

Este video muestra un procedimiento quirúrgico para injertar un músculo vascularizado en la superficie del cerebro después de una oclusión transitoria de la arteria cerebral media. El injerto promueve la formación de nuevos vasos sanguíneos en la región isquémica, mejorando el suministro de oxígeno y nutrientes. Con el tiempo, el músculo integrado apoya la supervivencia neuronal y ayuda en la recuperación posterior al accidente cerebrovascular.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité de cuidado de animales institucional local y la junta de revisión veterinaria JoVE.

1. Cirugía de encefalomiosinangiosis (EMS)
   1. Después de 60 minutos de oclusión de la arteria cerebral media (MCAo), aleatorice los ratones en grupos de MCAo solo o MCAo + EMS. Realice EMS 4 h después de MCAo (grupo MCAo + EMS) o cirugía simulada para experimentos seleccionados (grupo solo EMS). Cámbiese a un nuevo par de guantes quirúrgicos estériles antes de la cirugía.
      NOTA: Los ratones se recuperaron de la anestesia después de 60 minutos de MCAo y fueron anestesiados nuevamente antes de la cirugía EMS.
   2. Para los grupos que reciben EMS (MCAo + EMS o grupos solo de EMS), haga una incisión cutánea de 10-15 mm con tijeras, que se extienda desde 1-2 mm rostral hasta la oreja derecha hasta 1-2 mm caudal hasta el ojo derecho.
      NOTA: Se utilizaron tijeras estériles para evitar daños accidentales en los músculos temporales que se encuentran debajo.
   3. Retraiga los colgajos de piel con pinzas e identifique visualmente el músculo temporal y el cráneo.
   4. Diseccionar sin rodeos el músculo temporal lejos del cráneo con unas tijeras con una técnica de extensión. Realice una miotomía de 2-3 mm dirigida ventralmente a lo largo del borde caudal del músculo para facilitar la reflexión ventral.
   5. Realice una craneotomía de ~ 5 mm de diámetro en el cráneo debajo del músculo temporal reflejado con un microtaladro.
   6. Retire la duramadre con pinzas para exponer la superficie pial del cerebro. Tenga mucho cuidado para evitar lesiones accidentales en el cerebro.
   7. Sutura el borde dorsal del músculo temporal al tejido subcutáneo del colgajo de piel dorsal con 6-0 filamentos monocrilos, haciéndolo al ras de la corteza cerebral expuesta.
   8. Cierre la incisión cutánea con una sutura de monofilamento 6-0. Vuelva a colocar el ratón en su jaula y controle hasta que se recupere de la anestesia. Regrese el ratón a su instalación de alojamiento.

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
6-0 sutura monocril	Ethilon	697G
70% etanol para desinfectar la superficie operativa	Solución Walgreen
Bupivacaine 0.25%	Midwest Vet
Abrazaderas para retracción de tejido	Roboz
Doccal sutura con recubrimiento de nailon	Doccal corporation Sharon MA	602145PK10Re
Almohadilla térmica eléctrica para superficie
Anestesia con isoflurano	Piramal Critical Care Inc
Aparato de administración de isoflurano	-- B6Surgivet (Isotech 4)
Micro taladro	Harvard Apparatus
Pinzas de microdisección, curvadas x2	Piramal Critical Care Inc
arrat	R&D biotech	ARY015
Controlador de aguja	Ethilon
Operating microscopio	Olympus
Superficie de operación	Tijeras quirúrgicas Olympus
	Roboz

de operación Panel de angiogénesis de ratón de