Trasplante estereotáxico de suspensión de células neurales en un ratón con lesión cerebral traumática

Resumen

Fuente: Furmanski, O., et al. Modelo de impacto cortical controlado de lesión cerebral de ratón con trasplante terapéutico de células neurales derivadas de células madre pluripotentes inducidas por humanos. J. Vis. Exp. (2019)

En este video, las células neurales derivadas de células madre pluripotentes inducidas por humanos se inyectan estereotáxicamente en el borde de materia gris-materia blanca de la corteza profunda en un modelo de ratón de lesión cerebral traumática. Las células trasplantadas se integran en el tejido, promoviendo la recuperación funcional y la reparación del circuito en el cerebro lesionado.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité de cuidado animal institucional local y la junta de revisión veterinaria JoVE.

1. Trasplante estereotáxico de suspensión celular

1. Comience el procedimiento de trasplante celular aproximadamente 24 h después de la craniectomía.
2. Prepare el equipo de trasplante de células y los suministros quirúrgicos
   1. Llene una jeringa de punta deslizante de 1 ml con solución salina estéril para la irrigación de la herida. Coloque una aguja de 25 G en la jeringa para controlar la irrigación.
   2. Llene una jeringa de punta deslizante de 1 ml con solución....

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
1 ml jeringas	Becton Dickinson (BD)	309659
1,7 ml tubos de ensayo abatibles	Denville	C2170
jeringa de 10 microlitros	Hamilton	7635-01
25G Agujas de jeringa Precision Glide	Becton Dickinson (BD)	305122
70% Etanol			Producto de elección; varía según la región
Suspensión oral de acetaminofén	Tylenol (para niños)		Diluir a 1 mg/ml en agua
Vaporizador anestésico	Vetland	0521-11-22
Paño		de manipulación de animales	Compra en grandes almacenes
Betadine	Purdue Products	NDC-67618-151-32
Oxígeno			Producto de elección; varía según la región
Ciclosporina A	Sigma-Aldrich	30024-100mg
Dimetilsulfóxido (DMSO)	Sigma-Aldrich	D8418-500ml
DMEM	Invitrogen (ThermoFisher)	A14430-01
Cinta aislante	3M Corporation		Compra en
grandes almacenes Pinzas finas	Herramientas de ciencia fina	11254-20
Pinzas	de ciencia fina	91106-12
Pipetas capilares de vidrio, 1 mm de diámetro exterior, 0,58 mm de diámetro interior	World Precision Instruments	1B100F-3
Kit de Micromotor Rotativo de Alta Velocidad	Foredom Electric Co.	K.1070 - K.107018
Ideal Micro Drill Burr Set De 5	Cell Point Scientific	60-1000
Impactador estereotáxico de impacto único para CCI	Leica Biosystems	39463920
Isoflurano	Baxter	NDC-10019-360-60
Temporizadores de banco de laboratorio	Fisher Scientific	14-649-17
Micropipeta extractor	MicroData Instruments, Inc.	PMP-102	Cualquier extractor será suficiente
Cubreobjetos de microscopio	Fisherbrand	12-545-E
Medio			Producto de elección
Espejo			Compra en tienda departamental
Portaagujas hemostático	Herramientas de ciencia fina	12002-12
Oftálmico ungüento	Falcon Pharmaceuticals	NDC-61314-631-36
Tijeras de resorte oftálmico	Fine Science Tools	15018-10
Caja			de plástico Comprar en grandes almacenes
Cilindro			de plástico Comprar en grandes almacenes
Bomba de jeringa motorizada QSI	Stoelting	53311
Accesorio de compresión de aguja extraíble	Hamilton	55750-01
Marco estereotáxico pequeño para roedores	Tijeras pequeñas Stoelting	51925
	ciencia fina	14060-09
StemPro Accutase	Invitrogen (ThermoFisher)	A1110501
Almohadillas de preparación de alcohol estéril	Fisherbrand	06-669-62
Hisopos de algodón estériles/Q-tips Kendall	Tyco Healthcare	540500
Solución salina estéril	Hospira	NDC-0409-1966-07
Cronómetros (2)	Fisher Scientific	06-662-56
Portaobjetos de microscopio Superfrost Plus Gold	Fisherbrand	15-188-48
Suturas - 5.0 seda con aguja curva	Oasis	MV-682

comprimido Herramientas de montaje de portaobjetos de microscopio Herramientas de