Administración intravenosa de nanopartículas terapéuticas en un modelo de glioblastoma murino

Resumen

Fuente: Kim, B. D., et al. Entrega de nanopartículas de una carga útil de oligonucleótidos en un modelo animal de glioblastoma multiforme. J. Vis. Exp. (2024)

Este video demuestra la inyección intravenosa de nanopartículas terapéuticas en un ratón portador de glioblastoma. El método permite la administración dirigida a través de la barrera hematoencefálica y admite imágenes no invasivas para evaluar la biodistribución de nanopartículas y la eficacia terapéutica en tumores cerebrales.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité de cuidado animal institucional local y la junta de revisión veterinaria JoVE.

1. Administración de MN-anti-miR10b

NOTA: En este estudio, las inyecciones se realizaron una vez a la semana durante 6 semanas a partir de los 7 días posteriores a la implantación, pero se puede usar el mismo protocolo para varias frecuencias de inyección.

1. Pesar el ratón y calcular el volumen de MN (nanopartícula magnética)-anti-miR10b para administrar al ratón. Las dosis de MN-anti-miR10b se administran a 20 mg de Fe (hierro)/kg en modelos murinos de GBM (glioblastoma multiforme). Por ejemplo, un ratón de 20 g recibe una dosis de 80 μL de 5 mg Fe/mL de MN-anti-miR10b. Los ratones de control reciben un volumen igual de PBS (solución salina tamponada con fosfato) consistente con este esquema de dosificación.
2. Prepare una jeringa de 28G con la dosis de MN-anti-miR10b y asegúrese de que no haya burbujas en la solución inyectable.
3. Anestesiar el ratón bajo 2%-4% de isoflurano para inducción y 1,5%-2% para mantenimiento con un caudal de 1,5 L/min en una caja de inducción. Mueva el ratón a un cono de nariz y continúe administrando anestesia. Verifique la profundidad de la anestesia y aplique ungüento veterinario.
4. Esterilice la cola con una toallita de isopropanol al 70% y deje que se seque el exceso de alcohol.
5. Gire la cola para colocar las venas caudales laterales en la parte superior de la cola. Luego, apuntando a la vena, inserte la aguja en la cola y establezca un vacío tirando hacia atrás del émbolo.
6. Inserte la aguja hasta que la sangre ingrese a la jeringa, lo que indica una entrada exitosa en la vena.
7. Inyecte lentamente MN-anti-miR10b y retraiga la aguja después de completar el parto. Aplique presión en el lugar de la inyección con una gasa hasta que se detenga el sangrado.
8. Retire el ratón del cono de la nariz. Monitoree al ratón hasta que esté completamente recuperado y ambulatorio.
   NOTA: La administración en bolo de nanopartículas puede causar dificultad respiratoria. Controle cuidadosamente el ratón y aplique inmediatamente compresiones torácicas ligeras si hay signos de dificultad respiratoria.

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Athymic nude "J:NU" ratones Jackson	Laboratory	RRID:IMSR_JAX:007850	Toallita de
isopropoílico al 70%	Cardinal	MW-APL	Toallita antiséptica tópica para la implantación de tumores y la inyección en la vena de la cola
Isoflurano	Covetrus	11695067772	Anethesia
Vaporizador de isoflurano	SOMNI Scientific	VS6002	Aparato de anestesia
Jeringa de insulina 1CC 29G X 1/2 "	Becton, Dickinson	324704	Jeringa para inyección de D-Luciferina e inyección de nanopartículas en la vena de la cola

alcohol del modelo de ratón inmunocomprometido