Ensayo de fototaxis de cianobacterias filamentosas utilizando iluminación de luz focalizada

En este artículo

Resumen

Fuente: Weber, N. et. al., Transformación natural, expresión de proteínas y crioconservación de la cianobacteria filamentosa Phormidium lacuna. J. Vis. Exp. (2022)

Este video demuestra un ensayo basado en LED enfocado para estudiar la fototaxis en cianobacterias filamentosas. Las bacterias migran hacia la fuente de luz, formando una densa acumulación en el centro iluminado, que se visualiza y cuantifica mediante el análisis de intensidad de píxeles de la imagen capturada.

Protocolo

Ensayo para fototaxis
1. Para los experimentos de fototaxis, prepare soportes de diodos emisores de luz (LED) (aquí, con una impresora 3D) en los que los LED de 5 mm seleccionados se montan para irradiar un área de 20 mm² de abajo hacia arriba (Figura 1). Si es necesario, utilice muchos soportes de LED en paralelo, conectando cada LED eléctricamente a través de una resistencia y un potenciómetro a una fuente de alimentación ajustable. Mida y ajuste las intensidades de los LED, según el experimento. Asegúrese de que todo el entorno esté en una habitación oscura o en un recipiente cerrado y oscuro.

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Resultados

Figura 1: Experimento de fototaxis. Izquierda: Soporte de LED con 4 LED rojos, conectado a una fuente de alimentación ajustable. En la parte superior de cada LED, hay una placa de Petri de 6 cm con 8 ml de cultivo de Phormidium lacuna. Derecha: Placa de P.......