Este video demuestra un ensayo de agar semisólido basado en colorantes redox para evaluar la motilidad bacteriana distinguiendo visualmente cepas móviles y no móviles.
NOTA: Se aislaron ochenta cepas del medio acuático y se identificaron utilizando un instrumento automatizado de identificación de bacterias (ver la Tabla de Materiales), incluyendo Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella spp., Vibrio spp., Klebsiella pneumoniae y Aeromonas hydrophila (Tabla 1). Staphylococcus aureus (ver la Tabla de Materiales) se utilizó como control inmóvil negativo; Se utilizaron Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa y Salmonella typhimurium (ver la Tabla de Materiales) como cepas de control positivo.
Identificar cepas bacterianas de prueba que se utilizarán para el análisis de motilidad.
Incluya controles negativos inmóviles y cepas de control positivo móviles.
Observación de la motilidad bacteriana mejorada por TTC
Recoger colonias individuales de bacterias de prueba de placas de agar e inocularlas en el medio semisólido con TTC (cloruro de 2,3,5-trifeniltetrazolio) perforándolas con agujas de inoculación.
Cultive los tubos a 37 °C en la incubadora durante 24-48 h para observar los resultados.
Observe el estado de crecimiento: caracterice las bacterias como inmóviles (-) si solo la línea de punción es roja. Caracterice las bacterias como móviles (+) si el color rojo se extiende ligeramente hacia afuera a lo largo de la línea de punción.
Tabla 1: Comparación de la motilidad bacteriana.
Colar
Medio semisólido con agar 0,4%
Medio semisólido con 0,4% de agar y 0,005% de TTC
24 h
48 h
24 h
48 h
P. aeruginosa ATCC27853
+
+
+
+
E. coli ATCC25922
+
+
+
+
S. typhimurium ATCC14028
+
+
+
+
S. aureus ATCC25923
-
-
-
-
E. coli (15)
12
14
13
14
Salmonella spp. (8)
7
8
8
8
A. hydrophila (20)
18
20
20
20
Vibrio spp. (8)
7
8
8
8
P. aeruginosa (24)
18
20
22
23
K. pneumoniae (5)
-5
-5
-5
-5
Los números indican el número de cepas positivas (+) y manchas negativas (-).
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Materiales
Lista de materiales utilizados en este artículo
Nombre
Empresa
Número de catálogo
Comentarios
Bacto Agar
Difco
Escherichia coli
ATCC
ATCC25922
Control positivo
Pseudomonas aeruginosa
ATCC
ATCC27853
Control positivo
Staphylococcus aureus
ATCC
ATCC25923
Control negativo inmóvil
Triptosa
OXOIDE
TTC (cloruro de 2,3,5-trifenil-tetrazolio)
Sigma
298-96-4
Sistema automatizado de identificación microbiana VITEK 2
Bio Mérieux
Reimpresiones y permisos
Solicitar permiso para reutilizar el texto o las figuras de este artículo de JoVE