Realización de la administración bacteriana intratraqueal en un modelo de ratón

Resumen

Fuente: Venuprasad, K., et al. Administración intratraqueal de Haemophilus influenzae en modelos de ratón para estudiar la inflamación de las vías respiratorias. J. Vis. Exp. (2016)

Este video demuestra la administración intratraqueal de un inóculo bacteriano patógeno pulmonar en un ratón anestesiado para modelar la infección del tracto respiratorio inferior.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité de cuidado animal institucional local y la junta de revisión veterinaria JoVE.

1. Instilación intratraqueal (i.t.)

1. Inyectar al ratón por vía intraperitoneal (i.p.) con 0,1 ml/10 g de peso corporal del ratón con una solución de 150 mg/ml de ketamina + 20 mg/ml de xilacina. El procedimiento debe realizarse en la capucha con una fuente de luz para mantener caliente al animal.
2. Pellizque el espacio interdigital del ratón para verificar que el ratón está adecuadamente anestesiado.
3. Coloque el mouse sobre su espalda. Afeitar la zona ventral del cuello y desinfectar con clorhexidina y alcohol etílico al 70%.
4. Levante la piel de la parte ventral superior del cuello con pinzas de dientes de rata. Haga una pequeña incisión (0,5-1,0 cm) por encima del timo con un bisturí y diseccione cuidadosamente el músculo para exponer la tráquea.
   1. Con una jeringa de 1 ml con una aguja de 27 G, inyecte lentamente 0,05 ml de aire, seguido de 0,05 ml de Haemophilus influenzae no tipificable (NTHi) o solución salina como control, seguido de otros 0,05 ml de aire. Mantenga al animal vertical durante aproximadamente 1 minuto.
5. Cierre la incisión con pegamento quirúrgico. Mantenga el ratón lateralmente recostado y caliente durante unos 10 minutos.

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Solución rápida y hábil	Sigma	GS500-500ML
Aguja de jeringa 20/26 G	BD	REF305115/175
Jeringa de 1 ml	BD	REF 309602
Tijeras de disección, rectas, de 10 cm de largo	Kentscientific	INS600393
Pinza de iris, dentada, de 10 cm de largo	Kentscientific	INS650915
Pinza 5 acero inoxidable, 11 cm de largo	Kentscientific	INS600095