Exponer una comunidad bacteriana oral sintética a fases simuladas de digestión

Resumen

Fuente: Arroyo, M. C., et al. Evaluación de la viabilidad de un consorcio bacteriano sintético en la interfaz intestino-microbio in vitro . J. Vis. Exp. (2018)

Este vídeo demuestra la evaluación de la viabilidad de una comunidad microbiana oral sintética durante la digestión simulada oral, gástrica e intestinal. La supervivencia bacteriana se cuantifica tras cada fase, lo que revela un declive progresivo debido al estrés digestivo.

Protocolo

1. Supervivencia bacteriana tras condiciones de tránsito gastrointestinal in vitro

NOTA: Prepara fluidos de digestión simulados con las modificaciones descritas a continuación. Prepara todas las diluciones con agua ultrapura. Filtrar todas las soluciones mediante un filtro de 0,22 μm y realizar el procedimiento de digestión en condiciones estériles.

1. Digestión oral:
   1. Colocar 3 mL de la comunidad bacteriana en un tubo estéril de 50 mL, mezclar con 3 mL de fluido salival simulado (SSF), que contenga en milimoles por litro (mmol L⁻¹): cloruro de ....

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Mucina del estómago porcino tipo II	Sigma-Aldrich	M2378
PBS	Gibco	14190250
Millipore Milli-Q academic, sistema de agua ultra pura	Millipore, Merck KGaA	-
Incubadora InnOva 4080	Científica de Nuevo Brunswick	8261-30-1007
Agua libre de nucleasas	Electroforesis Serva	28539010
Citómetro de flujo BD Accuri C6	BD Biociencias	653118
Kit InnuPREP PCRpure	Analytik Jena	845-KS-5010250	Kit de purificación PCR