Visualización de la infección del tracto urinario en un modelo murino usando bioluminiscencia

Abstract

Fuente: Luyts, N., et al. Seguimiento longitudinal de infecciones urinarias y su tratamiento en ratones mediante imagen bioluminiscencia. J. Vis. Exp. (2021).

Este vídeo muestra la inducción y seguimiento de la infección urinaria en un modelo murino utilizando E. coli bioluminiscente inyectada en la vejiga, donde ocurren adhesiones, invasión y replicación intracelular bacteriana. La luz emitida por el operón bioluminiscente sirve como marcador en tiempo real de la carga bacteriana durante la progresión de la infección.

Protocol

Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité local de cuidado institucional de animales y la junta veterinaria JoVE.

1. Inoculación de los animales

1. Preparación de los animales
   1. Elige la(s) cepa(s) de ratón deseada(s) en función de la pregunta de investigación y la disponibilidad de líneas knock-out, detalles experimentales y diferencias en la susceptibilidad a las ITU. Ten en cuenta que la cateterización transuretral es más fácil en ratones femeninos. No uses animales menores de 8 semanas, ya que son inmunológicamente inmaduros. Aquí se utilizaron ratones hembras C57Bl/6J ....

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Vaporizador de anestesia	Aparato de Harvard limitado	N/A	https://www.harvardapparatus.com/harvard-apparatus-anesthetic-vaporizers.html
Baytril 100 mg/mL	Bayer	N/A	Enrofloxacina
BD Insyte Autoguard 24 GA	BD	382912	Angiocateter amarillo, usa una punta plástica estéril para la instilación
Ratones C57Bl/6J	Janvier	N/A
Centrífuga 5804R	Eppendorf	EP022628146
Dropsense 16	Laboratorios Desencadenados	Trineo	para medir el diámetro exterior 600nm
Suero tamponado con fosfato de Dulbecco, Gibco	ThermoFisher Scientific	REF 14040-083
Etanol 70% desnaturalizado 5L	VWR internacional	85825360
Falcon 14 ml tubo de poliestireno con fondo redondo, tapa de presión	Corning	352057
Falcon 50ml Cellstart	Greiner	227285
Jeringuilla Hamilton GASTIGHT, bloqueo de luer de PTFE, 100 μL	Sigma-Aldrich	26203	para asegurar una lenta instillación bacteriana de 50 μL
Bucle de inoculación	Roth	6174.1	poseedora: Art. Nº 6189.1
Iso-Vet 1000mg/g	Productos veterinarios Dechra	N/A	Isoflurano
Sistema de Imagen In Vivo del Espectro IVIS	PerkinElmer	REF 124262	Dispositivo de imagen