Preparación de un cultivo bacteriano en suelo para infección por bacteriófagos

Resumen

Fuente: Cross, T., et al., Técnica de enriquecimiento optimizada para el aislamiento de especies de bacteriófagos de artrobacter a partir de muestras de suelo. J. Vis. Exp.(2015)

Este vídeo muestra la preparación de un cultivo bacteriano para la producción de bacteriófagos. Cubre los pasos de inoculación de una bacteria del suelo en un matraz con concierto, promoviendo un crecimiento uniforme mediante aireación y agitación, y monitorizando la densidad celular mediante mediciones ópticas de densidad. Una vez que el cultivo alcanza la fase óptima de crecimiento, está listo para una producción eficiente de bacteriófagos.

Protocolo

Preparación de células de artrobacter para aislamiento de fagos

• Cultivo Arthrobacter sp. Las colonias KY3901 estradas sobre una placa de agar Luria Bertani (LB) incubadas a 30 °C durante 2-3 días. Elige una colonia y utiliza un lazo estéril para añadirla a 250 ml de caldo LB en un matraz de cultivo con defleitos e incubar en una incubadora agitada a 225 rpm a 30 °C.
• Permitir aproximadamente 24 horas de crecimiento para obtener células de fase exponencial tardía/estacionaria temprana para experimentos de infección por fagos. Monitoriza de cerca el estado del crecimiento bacteriano para evitar que las célul....

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Polvo de caldo LB	Fisher	BP9722-2
Agar granulado	Fisher	BP1423-2
Tubos Eppendorf	Fisher	05-408-129
Pipetas individuales de 5 ml	Fisher	13-678-11D
Tubos cónicos de 50 ml	Fisher	76002844
Tubos cónicos de 15 ml	Fisher	76002845
Pipetas individuales de 10 ml	Fisher	13-676-10J
25 ml pipetas individuales	Fisher	13-676-10K