Establecimiento de biopelículas bacteriana-fúngica cruzadas para el estudio de la patogénesis oral

Resumen

Fuente: Schlafer, S, y Frost Kristensen, M. Monitorización del pH extracelular en biofilms inter-reino mediante microscopía confocal. J. Vis. Exp. (2020)

Este vídeo demuestra el cultivo de biopelículas cruzadas de Streptococcus mutans y Candida albicans bajo condiciones similares a las orales para modelar las interacciones bacteriana-fúngica, permitiendo el estudio de la sinergia microbiana, la adhesión mediada por glucano y la virulencia acidogénica en la patogénesis oral.

Protocolo

Todos los procedimientos relacionados con la recogida de muestras se han realizado de acuerdo con las directrices del IRB del instituto.

1. Cultivo de biopelículas inter-reinos

1. Cultivar Streptococcus mutans (S. mutans) DSM 20523 y Candida albicans (C. albicans) NCPF 3179 en placas de agar sanguíneo a 37 °C bajo condiciones aeróbicas.
2. Transfiere las colonias individuales de cada organismo a tubos de ensayo llenos de 5 mL de infusión cerebral y corazón (BHI). Cultiva durante 18 horas en condiciones aeróbicas a 37 °C.
3. Centrifuga los cultivos nocturnos a 1.200 x g durante 5 minutos. Descarta el sobrenadante, resuspende las células en soluc....

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Placas de agar con sangre	Instituto de Suero Statens	677
Infusión cerebral y corazón	Oxóide	CM1135
Infusión cerebral y corazón + 5 % sacarosa	Suministros de laboratorio BDH	10274
Candida albicans	Colección Nacional de Hongos Patógenos	NCPF 3179
Suero fetal bovino	Tecnologías de Gibco Life	10270
Centrífuga refrigerada GS-6R	Beckman	N/A
μ-Plate 96 Pozo Negro	Ibidi	89626
Solución fisiológica estéril	VWR	6404
Streptococcus mutans	Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen	DSM 20523
Vis-espectrofotómetro V-3000PC	VWR	N/A