Evaluación basada en microscopía de la unión bacteriana a las superficies radiculares de las plantas

En este artículo

Resumen

Fuente: Matthysse, A. G. Adherencia de bacterias a superficies vegetales medida en laboratorio. J. Vis. Exp. (2018).

Este vídeo demuestra la evaluación de la unión bacteriana a las raíces de las plantas mediante microscopía de contraste de fase. Las muestras de raíces de plántulas incubadas con bacterias se montan primero para comprobar la existencia de bacterias libres. Las muestras se lavan para eliminar bacterias sueltas y se vuelven a montar usando una cubierta adecuada para evitar daños. Finalmente, el número de bacterias adheridas a los pelos radiculares se cuenta al microscopio.

Protocolo

1. Inoculación de la bacteria

Determinar el número de bacterias a inocular con referencia a la medición que se va a utilizar para determinar la adhesión bacteriana y la duración del tiempo de incubación.
Para estudios microscópicos que impliquen tiempos de incubación inferiores a 1 día, inocular un número relativamente grande de bacterias. Añade una cantidad de cultivo para alcanzar una concentración bacteriana final superior a^10,6 bacterias por mL. Para tiempos de incubación más largos, reduce el tamaño del inoculo bacteriano.
Para estudios en los que se mida la adhesión bacteriana mediante el recuento celular viable, se añade una ca....

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Resultados

Figura 1: Pasos en la preparación de una muestra para determinar el número de bacterias unidas. Agrobacterium tumefaciens se une a los pelos de las raíces del tomate (A, B y C) y a los hilos de nailon (D, E y F). En muestras montadas.......