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El conocimiento del número exacto de células viables en un determinado volumen de una suspensión celular que se requiere para las manipulaciones rutinarias de cultivo de tejidos, como las células de revestimiento de inmunocitoquímica o para transfecciones celulares. Este protocolo describe un método sencillo y rápido para diferenciar entre células vivas y muertas y la cuantificación de la concentración celular y el número total de células con un hemocitómetro. Este procedimiento requiere en primer lugar separar las células de la superficie de crecimiento y resuspensión de ellos en los medios de comunicación. A continuación, las células se diluyen en una solución de azul tripán (idealmente a una concentración que dará a 20-50 células por cuadrante) y se coloca en el hemocitómetro. Por último, el promedio de los conteos de células viables en varios cuadrantes seleccionados al azar, dividiendo el promedio por el volumen de un cuadrante de 1 mm 2 (0,1 l) y multiplicar por el factor de dilución da el número de células por l. Al multiplicar esta concentración de células por el volumen total en l da el número total de células. Este protocolo describe contar humana madre neurales / células precursoras (hNSPCs), pero también se puede utilizar para muchos tipos de células.