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El desplazamiento lateral de las células ortogonal a una corriente de flujo moviendo en los patrones de los receptores asimétrica presenta una oportunidad para el desarrollo de nuevos dispositivos para el sello libre de separación y análisis de las células 1. Estos dispositivos pueden usar el desplazamiento lateral de separación de flujo continuo, o los patrones de los receptores que modulan la adhesión para distinguir entre fenotipos de células diferentes o niveles de expresión del receptor. Comprender la naturaleza de las trayectorias de células rodando por los receptores de dibujos sustratos es necesario para la ingeniería de los soportes y el diseño de estos dispositivos.
Este sentido, demuestran un protocolo para el estudio de las trayectorias de células rodando por los patrones asimétricos que el apoyo de los receptores de adhesión celular móvil 2. Bien definida, m escala los patrones de P-selectina receptores fueron fabricados utilizando impresión por microcontacto en oro revestida de diapositivas que se han incorporado en una cámara de flujo. HL60 células que expresan el ligando PSGL-1 3 se fluyó a través de un campo de las líneas de estampado y se visualizaron en un microscopio de campo claro invertida. Las células laminadas y seguimiento a lo largo de los bordes inclinados de los patrones, lo que resulta en una desviación lateral. Cada celda generalmente rodó a una cierta distancia a lo largo de los bordes del patrón (definido como la duración de seguimiento de borde), separado de la orilla, y volver a colocar a un patrón descendente. A pesar de esta separación hace que sea difícil de rastrear toda la trayectoria de una célula de entrada a la salida de la cámara de flujo, las partículas de seguimiento de software se utilizó para analizar el rendimiento y las trayectorias de rodadura de las células durante el tiempo en que se movían en un solo receptor con dibujos de línea. Las trayectorias fueron examinados para obtener distribuciones de las velocidades de balanceo de células y la longitud de borde de rastreo para cada celda de diferentes modelos.
Este protocolo es útil para la cuantificación de las trayectorias de células rodando en los patrones de los receptores y sobre estos parámetros de ingeniería tales como el ángulo de patrones y esfuerzo cortante. Estos datos serán útiles para el diseño de dispositivos de microfluídica para el sello libre de separación celular y el análisis.