Imágenes basadas en nanosondas SERRS funcionalizadas con anticuerpos: una técnica de imagen Raman altamente sensible para detectar el cáncer de ovario metastásico in vivo

Resumen

Fuente: Andreou, C. et al. Radiometría de nanosonda de dispersión Raman con resonancia mejorada en superficie para la detección de cáncer de ovario microscópico mediante la segmentación del receptor de folato. J. Vis. Exp. (2019)

Este video describe la técnica de dispersión Raman de resonancia mejorada en superficie para detectar el cáncer de ovario metastásico utilizando nanosondas dirigidas, anticuerpos antirreceptores específicos y nanosondas de control no dirigidas. Este método ayuda a determinar la abundancia relativa de las dos nanosondas y a diferenciar las células cancerosas del fondo visceral.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado de animales y la junta de revisión veterinaria de JoVE.

1. Síntesis del núcleo de la nanoestrella dorada

NOTA: Las nanoestrellas de oro se utilizan como núcleos para ambos sabores de las nanosondas SERRS utilizadas en este experimento.

1. Prepare 800 mL de solución de ácido ascórbico (C₆H₈O₆) de 60 mM en agua desionizada (DI) y 8 mL de solución de 20 mM de ácido tetracloroáurico (HAuCl₄) en agua desionizada. ....

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Nombre del reactivo
ácido ascórbico	Sigma-Aldrich	A5960
3 MPTMS	Sigma-Aldrich	175617
Hidróxido de amonio (28%)	Sigma-Aldrich	338818
Anticuerpo anti-receptor de folato [LK26]	AbCam	AB3361
Dimetilsulfóxido	Sigma-Aldrich	276855
Dimetilsulfóxido (anhidro)	Sigma-Aldrich	276855
etanol	Sigma-Aldrich	792780
IR140	Sigma-Aldrich	260932
Perclorato IR780*	Sigma-Aldrich	576409	terminado*
Isopropanol	Sigma-Aldrich	650447
N.N.Dimetilformamida	Sigma-Aldrich	227056
*IR792	Sigma-Aldrich	425982	*alternativo
Ortosilicato de tetraetilo	Sigma-Aldrich	86578
PEG-maleimida	Sigma-Aldrich	900339
Reticulante PEG	Sigma-Aldrich	757853
Ácido tetracloroáurico	Sigma-Aldrich	244597
Nombre del equipo
Casete de diálisis (3.500 MWCO)	ThermoFisher	87724
Filtros centrífugos	Millipore	UFC510096
microscopio Raman confocal inVia	Renishaw