Ventana de huevo: un método para abrir la cáscara del huevo de gallina fertilizado para exponer la vasculatura de la membrana corioalantoidea

Resumen

Fuente: Sharrow, A. C. et al. Utilizando el modelo in vivo de la membrana corioalantoidea de pollo para estudiar cánceres ginecológicos y urelógicos. J. Vis. Exp. (2020)

En este video, describimos una técnica para abrir la cáscara de un huevo de gallina fertilizado para exponer su membrana corioalantoidea o CAM portadora de una red de vasos sanguíneos ramificados. La CAM expuesta se puede utilizar para el modelado tumoral in ovo.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran embriones de huevo de gallina han sido revisados por el comité institucional local de cuidado animal y la junta de revisión veterinaria de JoVE.

1. Preparando los huevos

1. Antes de recibir los huevos, ensamble y equilibre la incubadora de huevos a 37.8 °C (100 °F) con 60-70% de humedad siguiendo las instrucciones del fabricante><. nota: Para minimizar los riesgos de contaminación, se puede utilizar agua esterilizada en autoclave para controlar la humedad.
2. Al recibir huevos de gallina Rhode Island Red fertilizados de un proveedor de huevos certific....

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Roboz Quirúrgico	RS6703		Esto se proporciona a modo de ejemplo. Cualquier tijera curva similar trabajo también.
Dremel	8050-N/18		Este kit contiene todo lo necesario herramientas.
Huevos de laboratorio AA Inc.	N/A		Un proveedor local de huevos tendría que ser identificado, ya que este proveedor solo Entrega a nivel regional.
Almacén de incubadoras	HB1588D-NINGUNO-1102-1588-1357		Se pueden utilizar otras incubadoras de huevos, pero su fiabilidad tendría que ser verificado. Después de la implantación, una célula incubadora con el CO2 desactivado también se puede utilizar.
Almacén de incubadoras	Artículo 1102		Se pueden utilizar otros candelabros; sin embargo, esto es preferible entre los que hemos probado. Esta vela está incluida en el kit de incubadora antes mencionado.
Instrumento de precisión mundial	Año 15915		Esto se proporciona a modo de ejemplo. Cualquier pinza curva similar trabajo también. Múltiples marcas tienen se ha utilizado para este método.
Bd	305196		Esto se proporciona a modo de ejemplo. Cualquier aguja de 18G funcionaría semejantemente.
Herramientas de Bellas Ciencias	11008-13		Esto se proporciona a modo de ejemplo. Cualquier pinza similar o de otro estilo que se adapte a las preferencias de los investigadores sería apropiado.
Ciencias de la Microscopía Electrónica	72914		Esto se proporciona a modo de ejemplo. Las pinzas que se usan para alejarse La cáscara de la bioluminiscencia Las imágenes son de aproximadamente 12,8 cm largo con puntas de 3 mm de ancho.
Marca Pescadora	22-456-885		Esto se proporciona a modo de ejemplo. Cualquier bola de algodón estéril bastar.
Moore Médico	21272
Corning	353803		Esto se proporciona a modo de ejemplo. Cualquier plato similar y estéril de 10 cm puede usarse. Tratamiento de cultivo de tejidos no es necesario.
Tygon	AACUN017		Esto se proporciona a modo de ejemplo. Cualquier tubo de tamaño similar trabajo también.