Extracción de lóbulos individuales de la próstata: una técnica para recolectar lóbulos de próstata individuales de la próstata de ratón

Resumen

Fuente: Nath, D. et al. Identificación, caracterización histológica y disección de lóbulos prostáticos de ratón para modelos de cultivo de esferoides 3D in vitro. J. Vis. Exp. (2018)

Este video describe una técnica para recolectar lóbulos individuales de la glándula prostática de un modelo de ratón. Los lóbulos individuales se pueden utilizar para el análisis histológico y la investigación del cáncer.

Protocolo

Todos los procedimientos relacionados con animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado de animales y la junta de revisión veterinaria de JoVE.

>1. Anatomía macroscópica de la próstata y microdisección del lóbulo individual

NOTA: Esto se representa en las Figuras 1(i-n) y 2

1. Voltea el tejido con un par de pinzas romas de modo que el lado dorsal quede hacia arriba, mostrando los lóbulos dorsales, que se asemejan a las alas de una mariposa.
2. Recoja los lóbulos dorsales sujetando el lóbulo con pinzas y cortando la base con tijeras (Figura 1j).
3. Voltee el tejido restante hacia el lado ventral.
4. Recoja los lóbulos laterales, que son pequeños y generalmente envuelven la uretra por el costado, que están encajados entre los lóbulos anterior, ventral y dorsal (Figura 1k).
5. A continuación, recoja los lóbulos ventrales, que son más grandes que los lóbulos laterales y se encuentran en la uretra ventralmente (Figura 1l).
6. Por último, extraiga los lóbulos anteriores, el más grande de los cuatro, cortando y desechando la uretra (Figura 1m).
7. Procesar las piezas de tejido de acuerdo con las necesidades experimentales.

Resultados

Figura 1: Disección de la próstata del ratón. Imágenes paso a paso para la disección de la próstata del ratón desde el UGS: (a) extracción de grasa, (b) extirpación de la vejiga urinaria, (c) extirpación de los conductos deferentes, (d) vista ventral de la próstata con la uretra, (e) vista dorsal de la próstata con l...

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Instrumentos quirúrgicos para ratones (kit de disección de ratones)	Instrumentos de precisión mundial	KIT DE RATÓN
Microscopio de disección
RPMI medio	Thermofisher Científico	11875093
Medio de disección (DMEM + 10%FBS)	Thermofisher Científico	11965-084
Suero Fetal Bovino	Thermofisher Científico	10438018
PBS (solución salina tamponada con fosfato)	Thermofisher Científico	10010031
colagenasa	Thermofisher Científico	17018029	Prepare 10 veces el caldo (10 mg/ml) en RPMI, filtre la esterilización, alícuota y almacene a -20 °C
Jeringas y agujas	Fisher Científico