Congelación rápida de tejido muscular para seccionamiento: un protocolo para obtener secciones ultrafinas de tejido muscular murino congelado rápidamente

Resumen

Fuente: Bonetto, A. et al. El ratón portador de tumores de carcinoma de colon-26 como modelo para el estudio de la caquexia por cáncer. J. Vis. Exp. (2016)

Este video describe el procedimiento para congelar el tejido muscular y obtener sus secciones delgadas. La técnica puede ayudar a estudiar la caquexia relacionada con el cáncer en modelos de ratón con cáncer de colon.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado de animales y la junta de revisión veterinaria de JoVE.

1. Congelación y montaje muscular

1. Sumerja la mitad inferior de un vaso de plástico pequeño (50 ml) que contenga isopentano en nitrógeno líquido. El isopentano está listo para usar cuando se vuelve ligeramente viscoso y forma un laminado blanco sólido que recubre el interior del vaso de precipitados (temperatura: -160 °C).
   nota: Utilice siempre herramientas manuales de bronce o aluminio que no produzcan chispas. Evi....

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
oct	Tejido-Tek	4583
Criostato	Leica	CM1850
Discos de corcho	Ciencias de la Microscopía Electrónica	63305
Portaobjetos de vidrio Superfrost plus	VWR	48311-703