Modelado del tratamiento intratumoral con inhibidores de miARN: un método para analizar el efecto de los inhibidores de miARN en el crecimiento tumoral en un modelo murino

Resumen

Fuente: Ramírez-Moya, J. et al. Inhibición in vivo de microARN para disminuir el crecimiento tumoral en ratones. J. Vis. Exp. (2019)

Este video demuestra la administración in vivo de inhibidores de miRNA como agentes terapéuticos contra el crecimiento tumoral en modelos de ratón ortotópicos. La administración intratumoral de inhibidores sintéticos de miRNAs o antagomiRs les permite unirse e inhibir miRNAs endógenos, causando así una regulación positiva del ARNm y la supresión del crecimiento tumoral.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado de animales y la junta de revisión veterinaria de JoVE.

>1. Inoculación de células en el flanco y tratamiento de antagomiR intratumoral

1. Preparación de células
   1. Diseñar una línea celular de cáncer de tiroides humano Cal62 (mutaciones KRASG12R y p53A161D) para sobreexpresar una construcción transgénica que expresa constitutivamente GFP y luciferasa (CMV-Firefly Luc-IRES-eGFP). Seleccionar las células transgénicas por resistencia a los antibióticos o clasificando las células GFP positiv....

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Matriz de membrana basal: Matriz de membrana basal Matrigel de alta concentración	Corning	#354248
AntagomiR: inhibidor del miRNA mirVana	Termo Fisher	4464088	Listo para in vivo
Reactivo de administración in vivo: Reactivo Invivofectamine 3.0	Termo Fisher	FIV 3005
Control negativo: Inhibidor de miRNA mirVana, control negativo #1	Termo Fisher	4464077	Listo para in vivo
XenoLight D-Luciferin - Sustrato bioluminiscente de sal K+	PerkinElmer	122799	Diluido en PBS
Software de imagen in vivo: IVISLumina II Imaging System	Ciencias de la vida de Caliper