Preparación de andamio esofágico porcino descelularizado: una técnica para generar andamio acelular a partir de un esófago de cerdo

Resumen

Fuente: Green, N. H. et al. Producción, caracterización y usos potenciales de un modelo de mucosa esofágica humana con ingeniería tisular en 3D. J. Vis. Exp. (2015)

En este video, demostramos la preparación de un andamio de esófago de cerdo descelularizado, con su arquitectura bioquímica y composición preservadas, para aplicaciones de ingeniería de tejidos.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado de animales y la junta de revisión veterinaria de JoVE.

>1. Preparación de andamio esofágico descelularizado

1. Obtenga esófago porcino intacto en un matadero a partir de cerdos Landrace recién sacrificados que se utilizan para la producción de alimentos. Un solo esófago proporcionará andamios suficientes para aproximadamente 30 construcciones separadas.
   nota: Debido al extenso y lento protocolo de esterilización requerido, normalmente vale la pena obtener y procesar un mín....

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
DMEM	Tecnología de laboratorio	LM-D1112	Calentar en un baño de agua a 37 °C antes de usar
F12 de Jamón	Tecnología de laboratorio	LM-H1236	Calentar en un baño de agua a 37 °C antes de usar
Suero de becerro fetal	Tecnología de laboratorio	FB-1090
Factor de crecimiento epidérmico	Sistemas de I+D	236-EG-200	Preparar 200 μg/ml de solución madre en 10 mM de ácido acético, 1% de FCS
Toxina del cólera	Sigma-Aldrich	C8052	Preparar la solución madre en agua
L-Glutamina	Sigma-Aldrich	G7513
Penicilina-Estreptomicina	Sigma-Aldrich	P0781
Anfotericina B	Gibco	15290-026	Nombre de la marca: Fungizone
Pbs	Oxoide	BR0014	Disolver 1 comprimido en 100 ml de agua y esterilizar en autoclave
Colagenasa A	Roche	10103578001
Solución de povidona yodada	Ecolab	10830E	Nombre de la marca: Videne
etanol	Sigma-Aldrich	E7023
Chelex 100	Sigma-Aldrich	C7901
Suero para terneros recién nacidos	Gibco	26010074
Tubo universal de 15 ml	Sls	SLS7504
Bote de 180 ml	VWR	De 216 a 2603