Extracción de exosomas basada en perlas magnéticas: una técnica para aislar exosomas específicos de biofluidos

Resumen

Fuente: Tu, M. et al. Detección de biomarcadores exosómicos mediante liberación y medición inducida por campo eléctrico (EFIRM). J. Vis. Exp. (2015)

En este video, demostramos un procedimiento para aislar exosomas de biofluidos objetivo utilizando microperlas magnéticas. El procedimiento permite la captura rápida de exosomas, que se pueden utilizar para el análisis posterior.

Protocolo

1. Extracción de exosomas basada en perlas magnéticas

1. Pipetear una solución bien mezclada de 5 μL de micropartículas magnéticas recubiertas de estreptavidina en 495 μL de tampón de solución salina tamponada con fosfato (PBS) en un tubo de microcentrífuga para resuspender las perlas. Lave y vuelva a suspender las perlas con 500 μL de PBS tres veces utilizando una rejilla magnética. El bastidor es un conjunto de imanes en el lateral de una unidad de carcasa que puede contener los tubos de microcentrífuga de muestra.
   1. Para cada lavado, primero, deje reposar los tubos en la rejilla durante 1 minuto y luego use una punta de pipeta pa....

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Anticuerpo CD63 biotinilado	Ancell, Estados Unidos	215-030
Dynabeads MyOne Estreptavidina T1	Invitrogen, Estados Unidos	65601
Magnetismo de neodimio (1/10" de diámetro x 1/32" de grosor)	K&J Magnetics, Estados Unidos	DH101
Agua destilada ultrapura	Life Technologies, Estados Unidos	10977-023
Anti-Fluoresceína-POD, Fab fragmentos	Roche, Alemania	11426346910
Solución salina tamponada con fosfato	Life Technologies, Estados Unidos	10010023
Caseína/PBS	Fisher Scientific, Estados Unidos	37532

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