Estimulación Cerebral sector mediante una red de microfluidos y de la Cámara de perfusión estándar

Summary

Se demuestra la fabricación de un dispositivo de microfluidos sencillos que pueden ser integrados con el estándar de configuraciones de electrofisiología para exponer las superficies a microescala de un trozo del cerebro de una manera bien controlada para los diferentes neurotransmisores.

Abstract

Hemos demostrado la fabricación de un dispositivo de microfluidos de dos niveles que se pueden integrar fácilmente con las configuraciones existentes de electrofisiología. El dispositivo de microfluidos de dos niveles se fabrica utilizando un estándar de dos etapas negativas resistir ^un proceso de litografía. El primer nivel contiene microcanales con entrada y salida en cada extremo. El segundo nivel contiene micro orificios circulares situado a medio camino de la longitud del canal y centrado a lo largo con un ancho de canal. Método pasivo de bombeo se utiliza para bombear los líquidos desde el puerto de entrada al puerto de salida ^2. El dispositivo de microfluidos está integrado en off-the-shelf cámaras de perfusión y permite una integración perfecta con la configuración de electrofisiología. Los líquidos introducidos en el flujo de entrada de los puertos a través de los microcanales hacia los puertos de salida y escapar a través de las aberturas circulares situados en la parte superior de los microcanales en el baño de la perfusión. Así, la superficie inferior de la parte del cerebro situado en el baño y la cámara de perfusión por encima del dispositivo de microfluidos pueden estar expuestos a diferentes neurotransmisores. El espesor de la microescala dispositivo de microfluidos y el carácter transparente de los materiales [de vidrio cubreobjetos y PDMS (polidimetilsiloxano)] Se utiliza para hacer que el dispositivo de microfluidos permiten microscopía de la rebanada del cerebro. El dispositivo de microfluidos permite la modulación (espacial y temporal) de los estímulos químicos introducidos en el microambiente cerebral rebanada.

Protocol

SU-8 de fabricación de moldes

Maestro de la preparación

1. El maestro de SU-8 sobre un sustrato de obleas de silicio se prepara utilizando una de dos etapas estándar negativo resistir proceso de litografía.
2. Las marcas de alineación de la oblea de silicio se eliminan utilizando una cuchilla de afeitar como la altura de estas estructuras (que se encuentra a lo largo de la periferia externa de la oblea) es más que la estructura real del dispositivo.
3. La oblea de silicio se limpia con alcohol isopropílico y se secan en una corriente de N _2. Pilares de apoyo hechas de cintas con un espesor de menos de la estr....

Discussion

Existentes macroescala o micro cámaras de perfusión cerebral rebanada son limitados en términos de la resolución espacial que ofrecen a exponer las secciones de cerebro de neurotransmisores. La tecnología de los dispositivos de microfluidos demostrado aquí supera esta limitación utilizando técnicas bioMEMS simple. Se prevé que la simplicidad en la fabricación del dispositivo de microfluidos y la facilidad de integración con las configuraciones existentes de electrofisiología permite la aplicación generalizada de la tecnología de los disposi.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
RC-26GPL	Herramienta	Warner Instruments	W2-64-0236	Baño grande de perfil bajo RC-26GLP Cámara de grabación
SHD-26GH/10	Herramienta	Warner Instruments	W2-64-0253	Sujeción de rodajas de acero inoxidable para RC-26G, espaciado de rosca de 1,0 mm
PDMS (polidimetilsiloxano)	Reactivo	Dow Corning	Sylgard 184	Kit de elastómero de silicona
Plasma Preen-II 862	Tool	Sistemas Plasmáticos, Inc.		Sistema de plasma de microondas
Modelo P-1	Herramienta	Warner Instruments	W2-64-0277	Serie 20 Plataforma lisa, modelo P-1
Herramienta SA-NIK		Warner Instruments	W2-64-0291	Adaptador para Nikon Diaphot/TE200/TE2000, SA-NIK
ACSF (líquido cefalorraquídeo artificial) oxigenado, calentado)	Reactivo			La composición exacta variará según la aplicación