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Transformación de genes basada en vectores cromosómicos artificiales bacterianos binarios en plantas de Arabidopsis: una técnica para generar plantas transgénicas con inserción de una sola copia

July 8th, 2025

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Fuente: Tark-Dame, M., et al. Generando Plantas Transgénicas con Inserciones de Copia Única Utilizando el Vector Binario BIBAC-GW. J. Vis. Exp. (2018).

En este video, demostramos la generación de plantas transgénicas de Arabidopsis que expresan un transgén estable a través de la transformación de genes basados en cromosomas artificiales bacterianos binarios mediados por Agrobacterium.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Arabidopsis Transformación

  1. Preparar las plantas de Arabidopsis para la transformación.
    1. Cultive plantas de Arabidopsis en un invernadero o cámara de crecimiento climatizada hasta que estén floreciendo (12 macetas con 9 plantas cada una por inmersión).
    2. Sujete los primeros pernos para permitir que emerjan más pernos secundarios. Las plantas están listas para sumergirse 4-6 días después del recorte, cuando las plantas tienen muchas cabezas de flores inmaduras y no muchas silicuas fertilizadas.
  2. Inmersión floral
    1. Sumerja las inflorescencias durante 5-10 segu....

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Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
Figura 1: Bandeja llena de plántulas de Arabidopsis antes y después del tratamiento con glufosinato de amonio. Las plántulas que no expresan el gen bar que está presente en el adn t pBIBAC-BAR-GW mueren después de ser rociadas con una solución de glufosinato de amonio. Las fotos muestran la misma bandeja de plántulas (A) antes de rociar con glufosinato de amonio, 14 días después de la siembr.......

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Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
No se han declarado conflictos de interés.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Sulfato de kanamicina monohidratadoDuchefaK0126
Mezcla de enzimas clonasa Gateway LR Thermo Scientific - Invitrogen11791-019
Murashige Skoog medianoDuchefaM0221
agar-agarBd214010
Glufosinato de amonio (Basta)Bayer79391781
Generador de imágenes de fósforoGE Healthcare Ciencias de la VidaTifón FLA 7000
film transparente (envoltura de Saran)Omnilabo1090681
agarosaThermo Scientific - Invitrogen16500

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Binary Bacterial Artificial ChromosomeAgrobacterium mediated TransformationArabidopsis PlantsSingle copy InsertionFloral Dipping TechniqueFluorescence MicroscopyHerbicide Resistance ScreeningGenomic DNA ExtractionPCR AnalysisSeed specific Promoter

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