Ensayo de prueba tópica: una técnica para evaluar el potencial insecticida de los antagonistas de los receptores de dopamina en mosquitos hembra adultos mediante aplicación tópica

Resumen

Fuente: Brito-Sierra, C.A. et al., Protocolos para probar la toxicidad de nuevas químicas insecticidas para los mosquitos. J. Vis. Exp. (2019).

En este video, demostramos el ensayo de prueba tópica para determinar la toxicidad de un insecticida potencial en mosquitos hembra adultos. Utilizando un antagonista del receptor de dopamina que causa la inhibición letal de la neurotransmisión en los mosquitos, este método describe una forma de evaluar los efectos tóxicos de los insecticidas tras la aplicación tópica.

Protocolo

>Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado de animales y la junta de revisión veterinaria de JoVE

1. Cultivo de mosquitos adultos

NOTA: Las cepas de mosquitos susceptibles a insecticidas están disponibles en el Repositorio de Referencia de Investigación y Reactivos contra la Malaria. Las cepas recomendadas son las siguientes: cepa Aedes aegypti Liverpool (LVP), cepa Anopheles gambiae Kisumu (KISUMU1) y cepa Culex quinquefasciatus Johannesburg (JHB).

1. Cultivo de larv....

Resultados

Figura 1: Cultivo de mosquitos adultos. Imagen que muestra un cubo de plástico de 20 L utilizado para el cultivo de mosquitos adultos y el uso de un aspirador para eliminar los mosquitos.

Figura 2. Ensayo tópico para adultos re.......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Cepas de mosquitos susceptibles a insecticidas	Repositorio de referencia de investigación y reactivos contra la malaria	https://www.beiresources.org/MR4Home.aspx; Cepas recomendadas: cepa Aedes aegypti Liverpool (LVP), cepa Anopheles gambiae Kisumu (KISUMU1) y cepa Culex quinquefasciatus Johannesburg (JHB)
acetona	Mallinckrodt Químico	CAS 67-64-1	Uso para diluciones y control
Amitriptilina	Sigma-Aldrich	CAS: 549-18-8	Se puede diluir en acetona
Bifentrrina	Sigma-Aldrich	CAS: 51529-01-2	Piretromido sintético utilizado como control positivo
Micro-aplicador	Burkard Manufactura Co.	-	Herramienta necesaria para experimentos de aplicación tópica
Placa de cultivo celular de 24 pocillos con tapa	Corning Incorporado	3526	-
Ventajas de las gomas elásticas	Alianza de Caucho Co.	-	Se utiliza para sellar los vasos de papel
Jeringa de vidrio (1 ml)	Becton Dickinson y compañía.	512004	Necesario para las microaplicaciones. El vidrio es mejor que el plástico
Viales de centelleo desechables (20 ml)	Fisher Científico	74505-20	Los viales de vidrio evitan la evaporación
Tela de tul, blanco	Walmart	-	-
Vasos de papel	Dixie Productos de Consumo LLC.	PF15675/13D	Se utiliza para mantener mosquitos adultos en ensayos tópicos para adultos
Placas de Petri (150 mm)	Ciencias de la vida de Corning	-	Se utiliza para mantener a los mosquitos "dormidos" en frío sin contacto directo con el hielo
Pipetas de transferencia	Fisher Científico	13-711-7M	Se utiliza para clasificar las larvas
Microscopio estereoscópico	Olimpo	SZ6045	Se utiliza para evaluar ensayos de larvas y realizar microaplicaciones
Pinzas (finas)	Fontax	-	Se utiliza para manipular mosquitos adultos