Técnicas de ensayo

En este video, demostramos un ensayo para establecer la presencia de fosfolipasa en el extracto de veneno crudo de Anthopleura dowii, una anémona marina de mar. El ensayo utiliza una técnica de difusión en gel de agarosa, en la que la enzima fosfolipasa difunde y descompone los fosfolípidos incorporados en el medio sólido de manera radial.

En este video, describimos un ensayo de quiralidad celular para determinar el sesgo de alineación de las células en un límite geométrico confinado, como un micropatrón de anillo. La quiralidad es una propiedad inherente a la mayoría de los tipos de células y está determinada por factores genéticos y ambientales. Conocer la quiralidad de una población celular normal puede ayudar a cribar las células tratadas con fármacos.

Este video describe un ensayo colorimétrico para medir la actividad de la citrato sintasa mitocondrial presente en el homogeneizado tisular de Drosophila.

En este video, describimos un método basado en la colorimetría para determinar el contenido de hierro no hemo en el tejido hepático de ratón. El sulfonato de batofenantrolina se utiliza como sustrato cromogénico en presencia de un agente reductor, que convierte el hierro férrico en hierro ferroso quelastable.

Este video muestra una técnica de cuantificación para el CO2 liberado durante la oxidación del sustrato utilizando 14sustratos radiomarcados con C. El 14CO2 liberado queda atrapado en una solución alcalina y se cuantifica mediante un contador de centelleo. La oxidación de diferentes sustratos varía entre tejidos y refleja la condición fisiopatológica del tejido.

En este video, demostramos un procedimiento para investigar la organización de la septina en una bicapa lipídica soportada por vidrio in vitro utilizando microscopía de fluorescencia de reflexión interna total.

Este video describe la técnica de estudio del ensamblaje de la proteína septina en microesferas recubiertas con bicapas lipídicas. Esta técnica ayuda a comprender los ensamblajes dependientes de la curvatura de las proteínas en superficies curvas.

En este video, demostramos un ensayo de cribado para identificar la eficacia de nematicidas de moléculas pequeñas contra nematodos. Los nematicidas se consideran eficaces si causan una disminución en el número de nematodos móviles en la muestra después de la exposición.

En este vídeo, describimos un método para la detección de depósitos de calcio secretados por osteoblastos utilizando un colorante aniónico, Alizarin Red S. Primero se tiñen los osteoblastos cultivados y luego se recupera el colorante para la cuantificación colorimétrica de los depósitos de calcio o el grado de mineralización de los osteoblastos.

En este video, describimos el ensayo de contacto larvario para evaluar la toxicidad del antagonista del receptor de dopamina, amitriptilina, en las larvas de mosquitos en etapa de tercer estadio, vectores conocidos de varias enfermedades infecciosas humanas. La evaluación de la mortalidad larvaria tras la incubación con diferentes concentraciones de amitriptilina en diferentes intervalos de tiempo ayuda a determinar su concentración letal 50.

En este video, demostramos el ensayo de prueba tópica para determinar la toxicidad de un insecticida potencial en mosquitos hembra adultos. Utilizando un antagonista del receptor de dopamina que causa la inhibición letal de la neurotransmisión en los mosquitos, este método describe una forma de evaluar los efectos tóxicos de los insecticidas tras la aplicación tópica.

Este video muestra un ensayo de alimentación sanguínea para evaluar la mortalidad y la fecundidad de compuestos de prueba con nuevos modos de acción sobre mosquitos hembra. Esta técnica ayuda a detectar nuevas clases de insecticidas para matar la población resistente de mosquitos y controlar la propagación de enfermedades.

En este video, demostramos un ensayo de agregación de proteínas basado en células utilizando inhibidores del proteasoma, que bloquean la actividad del proteasoma, evitando que las proteínas mutantes mal plegadas, fusionadas a una etiqueta fluorescente, sufran una degradación proteasómica dependiente de ubiquitina, lo que lleva a su acumulación dentro del citoplasma celular. A continuación, los agregados de proteínas se visualizan y cuantifican mediante microscopía de fluorescencia.

Este video muestra un bioensayo rápido para investigar la actividad de endotoxinas en una muestra de sangre completa a través de un método basado en quimioluminiscencia. Este ensayo es una prueba de biomarcadores rápida y sensible para el diagnóstico en etapa temprana de la sepsis mediada por endotoxinas.

Este video describe el formato turbidimétrico del ensayo de lisado de amebocitos Limulus, o LAL, para estimar la contaminación por endotoxinas en nanoformulaciones de doxorrubicina liposomal pegilada. La turbidez de la solución después de la reacción de la endotoxina con el reactivo LAL ayuda a estimar la endotoxina en la muestra.

Este video describe un ensayo de coágulos de gel para determinar la presencia de endotoxinas bacterianas en nanoformulaciones utilizando el lisado de amebocitos de Limulus derivado de las células sanguíneas de cangrejos herradura. El ensayo ayuda a analizar la contaminación por endotoxinas de los productos farmacéuticos, incluidas las formulaciones basadas en nanotoxinas.

En este video, demostramos un ensayo de alto rendimiento para el cribado de enzimas activas en carbohidratos utilizando sustratos de hidrogel de polímeros cromogénicos insolubles. La enzima degrada estos sustratos en un producto coloreado soluble que se puede cuantificar midiendo la intensidad del color del producto.

Este video muestra un ensayo para detectar enzimas efectivas en la degradación de polisacáridos complejos en biomasa vegetal utilizando biomasa cromogénica insoluble o ICB. Las enzimas hidrolizan ICB para liberar oligosacáridos solubles ligados a colorantes, y la actividad enzimática se evalúa mediante un análisis colorimétrico del producto de la reacción.

Este video muestra un método de tinción nuclear para detectar el efecto citotóxico de mitocan en células cancerosas sensibles a medicamentos y variantes sanas. La doble tinción con colorantes de unión al ADN, como el yoduro de propidio y el colorante de Hoechst, proporciona una distinción clara entre las células muertas y las vivas, lo que ayuda a evaluar la citotoxicidad del fármaco.

En este video, realizamos un ensayo de motilidad in vitro para analizar las interacciones actina-miosina. El movimiento de deslizamiento de los filamentos de actina sobre las moléculas de miosina inmovilizadas se visualiza mediante microscopía de fluorescencia.

En este video, realizamos un ensayo de motilidad in vitro para analizar las interacciones actina-miosina. El movimiento de deslizamiento de los filamentos de actina sobre las moléculas de miosina inmovilizadas se visualiza mediante microscopía de fluorescencia.

Este video demuestra la acción capilar radial diferencial del ensayo de ligandos, una técnica para el cribado sistemático de alto rendimiento de proteínas de unión a segundo mensajero de nucleótidos intracelulares. Esta técnica permite la unión directa de los mensajeros a la proteína diana sobreexpresada en el lisado celular, evitando la necesidad de purificación de la proteína.

Este video describe un ensayo de degradación para proteínas mal plegadas utilizando el tratamiento con cicloheximida junto con el fraccionamiento de detergente. Este método ayuda a estudiar la dinámica de las proteínas mal plegadas y a descubrir en profundidad los mecanismos del recambio de proteínas.

Este video describe un ensayo de microplaca basado en fluorescencia in vitro para estudiar la cinética de degradación de una proteína mutante de luciferasa mal plegada marcada con fluorescencia expresada en los núcleos de células de mamíferos transfectadas. El ensayo consiste en el tratamiento de células que expresan la proteína mutante fluorescente con un inhibidor de la traducción y un inhibidor del proteasoma para evaluar la degradación mediada por el proteasoma de la proteína mal plegada.

El video muestra el ensayo de luciferasa utilizado para cuantificar proteínas marcadas con luciferasa. El ensayo utiliza una enzima luciferasa modificada genéticamente compuesta por un fragmento grande que se une con el fragmento pequeño, que se conjuga con una proteína de interés. Las subunidades unidas forman una enzima activa que, en presencia del sustrato, libera una señal luminiscente. A continuación, esta señal se cuantifica mediante un luminómetro.

Este video muestra un ensayo basado en imágenes in vivo para determinar la disminución de la proteostasis debido al envejecimiento. El ensayo utiliza Caenorhabditis elegans que expresa la proteína de fusión de poliglutamina YFP en los músculos de la pared corporal para medir la agregación de poliglutamina asociada a la edad y la inducción de proteotoxicidad, lo que conduce a la parálisis.

En este video, demostramos el ensayo homogéneo de proximidad luminiscente amplificado, un ensayo de proximidad basado en perlas. Utiliza perlas aceptoras y donantes de tamaño homogéneo, inmovilizadas con dos proteínas que tienden a interactuar para detectar posibles moléculas pequeñas que inhiben las interacciones proteicas.

Este video muestra un ensayo para monitorear la acidificación intestinal en moscas Drosophila. Después de la ingestión de alimentos complementados con un tinte indicador de pH, la acidificación de la luz intestinal da como resultado un cambio en el color del tinte. La inspección visual del tracto digestivo de las moscas para examinar el cambio de color proporciona evidencia de acidificación.

Este video describe un ensayo basado en un lector de placas para medir la absorción de calcio mitocondrial en mitocondrias aisladas. El ensayo analiza la señal de fluorescencia de un colorante fluorescente sensible al calcio para estudiar la cinética de la absorción de calcio mitocondrial y la sobrecarga de calcio.

Este video describe un método colorimétrico para cuantificar el contenido de proteínas solubles en tejidos vegetales. El método utiliza el colorante Coomassie Brilliant Blue G-250, que interactúa con la proteína soluble para formar un complejo de proteína-colorante estable de color azul, proporcional al contenido de proteína soluble en el tejido.

Este video describe el método para cuantificar los carbohidratos digeribles presentes en los tejidos vegetales. Esto ayuda a recopilar datos de varios tejidos vegetales para estudiar la ecología nutricional, las interacciones entre plantas y herbívoros y la dinámica de la red alimentaria.

En este video, demostramos el ensayo de luciferasa para cuantificar el crecimiento del patógeno intracelular Toxoplasma gondii. Utilizando una cepa de Toxoplasma que expresa la enzima luciferasa después de infectar las células huésped, la actividad de la luciferasa se detecta en el cultivo celular infectado para determinar la reproducción exitosa del parásito.

El video muestra el ensayo de luciferasa utilizado para determinar la eficacia de un inhibidor químico antiparasitario contra el patógeno intracelular Toxoplasma gondii. El estudio involucra a parásitos que expresan luciferasa que invaden las células huésped para replicarse y sobrevivir. El inhibidor químico se une a las cisteína proteasas del parásito e inhibe la replicación. La actividad luciferasa detectada es proporcional a los cambios en el crecimiento del parásito, lo que determina la...

Este video muestra un protocolo in vitro para estudiar la eliminación mediada por Msp1 de proteínas TA mal localizadas integradas en la bicapa lipídica de liposomas. Las proteínas Msp1 y TA se reconstituyen conjuntamente en liposomas, y la translocación dependiente de ATP de las proteínas TA se confirma mediante purificación por afinidad.

En este video, describimos un método simple y robusto para determinar el potencial citotóxico de un fármaco tripanocida contra un parásito, Trypanosoma cruzi, que expresa la enzima β-galactosidasa. β-galactosidasa sirve como indicador de lisis celular y su actividad se puede utilizar para evaluar los efectos del fármaco.

En este video, demostramos un ensayo que investiga los mecanismos de liberación de monoaminas de las neuronas de cortes de cerebro de ratas ex vivo metabólicamente activos, cuando se tratan con medicamentos de prueba. El ensayo demuestra que los fármacos neuroestimulantes inducen la liberación de monoaminas a través de los transportadores celulares de monoaminas, mientras que una alta concentración de KCl induce la liberación de monoaminas vesiculares mediada por la exocitosis de las vesículas...

Este video describe un método in vivo para evaluar el potencial protector de los compuestos de prueba neuroprotectores en la reducción de la agregación de polyQ en las células musculares de la pared corporal de nematodos y mejorar la proteotoxicidad asociada a la agregación.

En este video, describimos un método para evaluar el efecto neuroprotector de un compuesto de prueba, el astragalán, sobre la supervivencia neuronal en Caenorhabditis elegans de la neurotoxicidad mediada por poliQ. El ensayo utiliza Caenorhabditis elegans que expresan las repeticiones de polyQ anormalmente expandidas fusionadas con GFP en sus neuronas ASH para medir la supervivencia neuronal después del tratamiento con compuestos de prueba.

Este video describe un ensayo de evitación osmótica para examinar el comportamiento de quimioevitación en un modelo de gusano transgénico. El comportamiento de evitación se prueba en una placa en presencia de una barrera osmótica alta y un quimioatrayente. Los gusanos con una pérdida funcional de neuronas son atraídos por el quimioatrayente, atraviesan la barrera de alta osmótica y se paralizan en la zona de trampa debido a la solución anestésica.

Este video describe un ensayo colorimétrico para la medición de lactato en lisados celulares mediante el uso de la enzima lactato deshidrogenasa. Esta enzima convierte el lactato en piruvato, junto con la conversión de NAD en NADH que reacciona con los colorantes de tetrazolio y da un producto coloreado que se puede medir espectrofotométricamente para cuantificar el lactato.

Este video describe un ensayo colorimétrico para medir cuantitativamente piruvato en las fracciones celulares de Caenorhabditis elegans. Utilizando el peróxido de hidrógeno producido a partir de la reacción enzimática de la piruvato oxidasa con el piruvato celular, se oxida un tinte cromogénico para producir un producto coloreado, medido mediante colorimetría para determinar la concentración de piruvato.

Este video describe un ensayo espectrofotométrico para la estimación de la actividad de la glucógeno sintasa. El método se basa en la reducción de la absorbancia de NADH con el tiempo e indica la actividad de la glucógeno sintasa.

En este video, describimos un ensayo espectrofotométrico cualitativo para determinar el grado de ramificación en una muestra de glucógeno con una estructura no caracterizada. La comparación de los máximos de absorbancia de la muestra no caracterizada con los de los polisacáridos con estructuras ramificadas conocidas indica la presencia de ramificación en la muestra no caracterizada.

Este video muestra el ensayo de sustancias reactivas al ácido tiobarbitúrico (TBARS) para evaluar el estrés oxidativo en muestras biológicas.

Este video muestra el ensayo de complementación de luciferasa dividida para detectar interacciones proteína-proteína. En este ensayo, las proteínas de interés se marcan con fragmentos pequeños y grandes de la enzima luciferasa. Cuando las proteínas interactúan, los fragmentos grandes y pequeños se combinan para formar un complejo enzimático activo, que en presencia de un sustrato específico, libera una luminiscencia brillante que se puede medir.

Este video muestra la técnica para recolectar una muestra de suelo para el análisis de propiedades hidráulicas. Se despeja el área de muestreo y se evacua la corteza superior. A continuación, se coloca el anillo de muestreo en el suelo para recoger la muestra. A continuación, el anillo con la muestra se limpia, se etiqueta, se empaqueta y se transfiere sin perturbaciones para su análisis.

Fuente:Léa Rubira1, Hélène Sturer1, Louise Combette1, Sandra Santini1, Stéphane Renaud1, Cyril Fersing1,21Departamento de Medicina Nuclear, Institut régional du Cancer de Montpellier (ICM), Univ Montpellier, 2IBMM, Univ Montpellier, CNRS, ENSCMEste video demuestra la infusión segura y controlada de un radiofármaco utilizando una bomba peristáltica con un sistema de casete de doble línea. La configuración incluye la conexión de líneas salinas y de infusión, el posicionamiento del vial blindado y...

Source:Anthony J. Yosick1,2, Christine Massie1, Emma Knapp2, Hani A. Awad1,2,31Department of Biomedical Engineering, University of Rochester, US2Center for Musculoskeletal Research, Department of Orthopedics, University of Rochester Medical Center, USA3Department of Orthopedics, University of Rochester Medical Center, USAThe video demonstrates fall-related wrist fractures using human cadaver forearms with varying bone densities. Specimens are standardized by removing upper soft tissue,...

En este video, demostramos un ensayo para visualizar y cuantificar la absorción celular de vesículas extracelulares o EV. Este ensayo utiliza imágenes fluorescentes en 3D utilizando un microscopio confocal y permite distinguir los EV internalizados de los adheridos a la superficie celular.

Este video describe un ensayo de invasión utilizando una matriz de tres cámaras basada en la impedancia eléctrica. Esta técnica mide el potencial invasivo de las células cancerosas bajo la influencia de factores solubles secretados por las células estromales residentes en microambientes tumorales.

En este video, demostramos un ensayo de protección enzimática in vitro basado en lisostafina para cuantificar la internalización de Staphylococcus aureus en células A549. El ensayo ayuda en estudios cualitativos, cuantitativos y de caracterización de la carga bacteriana intracelular en las células huésped.

En este video, describimos un ensayo de reabsorción osteoclástica in vitro en placas de cultivo celular recubiertas de fosfato de calcio cultivadas con osteoclastos derivados de células mononucleares de sangre periférica humana. Los osteoclastos forman un anillo de actina característico en la matriz recubierta de fosfato de calcio de la placa de cultivo celular y degradan la matriz dentro de la región del anillo de actina para liberar iones de calcio y fosfato, lo que resulta en la formación de...

En este video, describimos un ensayo de separación de fases, en el que las proteínas intracelulares que comprenden regiones intrínsecamente desordenadas fusionadas a un dominio de oligomerización fotosensible son inducidas a través de la exposición a la luz azul para autoasociarse en condensados similares a líquidos sin membrana.

Este video muestra un ensayo modificado basado en perlas de microportadores que incorpora pericitos para estudiar la germinación endotelial durante las primeras etapas de la angiogénesis. El ensayo proporciona un modelo experimental in vitro para comprender los mecanismos moleculares de la angiogénesis y el efecto de las terapias antiangiogenéticas.

Este video describe un ensayo in vitro para determinar la hemólisis o lisis inducida por ionóforos de calcio de glóbulos rojos en una muestra humana. El ensayo mide el porcentaje de hemólisis cuantificando la hemoglobina liberada de los eritrocitos rotos.

En este video, demostramos el ensayo de unión a la anexina V para medir el grado de eriptosis, muerte celular programada con eritrocitos, utilizando la tinción fluorescente de anexina V. Los eritrocitos apoptóticos muestran una translocación de fosfatidilserina desde la valva interna a la externa de la membrana celular, lo que hace que la anexina V marcada con fluoróforos se una a la fosfatidilserina translocada, emitiendo así una señal fluorescente.

Este video muestra una técnica in vitro para evaluar la biodisponibilidad de hierro en fuentes de alimentos complejas. La técnica combina la simulación de la digestión humana junto con la absorción de hierro por parte de células Caco-2 diferenciadas. La formación de ferritina intracelular actúa como un marcador para la absorción de hierro celular.

Este video muestra un ensayo in vitro para medir indirectamente la absorción de glucosa intracelular. El ensayo utiliza un análogo de glucosa marcado con fluorescencia para establecer una correlación entre la depleción de glucosa extracelular y la absorción de glucosa intracelular.

En este video, demostramos una técnica ex vivo para medir el agotamiento del análogo de glucosa extracelular en órganos de ratón extraídos. Consiste en incubar el tejido del ratón en una solución que contiene desoxiglucosa marcada con fluorescencia, que es absorbida por las células. La absorción de análogos de glucosa se puede determinar indirectamente midiendo la fluorescencia del medio incubado.

Este video describe la medición de la contracción de las células del músculo liso aórtico (SMC) utilizando la detección de impedancia eléctrica de sustrato de la célula, o ECIS. ECIS mide la locomoción de las células y es un método fiable para medir las contracciones.

En este video, describimos un método in vitro para evaluar el potencial alérgico de un antígeno para inducir la degranulación de basófilos. β-hexosaminidasa se utiliza como índice de liberación de mediador químico, y la actividad enzimática de la β-hexosaminidasa se mide utilizando un sustrato fluorogénico.

En este video, demostramos un ensayo rápido de una sola adición para evaluar la viabilidad celular en organoides derivados del paciente tras el tratamiento con un agente de prueba que utiliza los niveles de ATP intracelular como marcador de la actividad metabólica celular. Los niveles intracelulares de ATP se miden mediante la reacción luciferasa/luciferina, donde la intensidad de la luz emitida indica la viabilidad celular y, a su vez, la potencia inhibidora del crecimiento del agente de...

Este video describe la técnica de visualización del estrés oxidativo en organoides cultivados. Este trabajo ayuda a comprender el nivel de estrés oxidativo debido a la acumulación de ROS en los distintos tipos celulares presentes en un organoide después del tratamiento con diferentes moduladores de ROS.

Este video muestra un ensayo de citometría de flujo para cuantificar los niveles de ROS en organoides intestinales 3D obtenidos de ratones transgénicos que expresan GFP. Este método proporciona un modelo experimental in vitro para investigar la eficacia de los compuestos de prueba en la producción de ROS.

En este video, demostramos un método para evaluar el efecto de los osmolitos en la formación de persistentes bacterianos. Las células bacterianas se exponen primero a los osmolitos para inducir estrés osmótico, lo que desencadena la formación de persistentes, y luego se tratan con antibióticos para enumerar los persistentes.

Este video muestra un método basado en microscopía de fluorescencia para estudiar la competencia bacteriana a nivel de una sola célula. Este método proporciona información sobre la estructura y función de las comunidades bacterianas.

Este video describe el ensayo de placa viral del virus infeccioso del herpes simple o VHS. Las partículas virales diluidas se inoculan a la monocapa de células epiteliales. Tras la incubación, el virus forma placas y se cuenta visualmente para determinar el título del virus infeccioso.

En este vídeo, se realiza el ensayo TUNEL para detectar la presencia de células apoptóticas en una muestra. El estudio consiste en el uso de una ADN polimerasa especial, la desoxinucleotidil transferasa terminal, que cataliza la adición de dUTP marcadas al extremo 3' del ADN fragmentado, que puede observarse e identificarse bajo un microscopio de fluorescencia.

Este video describe un ensayo luminiscente in vitro de Caspasa-3/7 para cuantificar la muerte celular o la apoptosis. El ensayo mide la luminiscencia producida después de la escisión de caspasa-3/7 de un sustrato DEVD proluminiscente. La luminiscencia generada es proporcional a la actividad de la caspasa-3/7.

Este video muestra una técnica de inmunotinción para visualizar la absorción de células apoptóticas en las células embrionarias homogeneizadas de Drosophila melanogaster. Este método proporciona información sobre la fisiología celular mediante la determinación del grado de envolvimiento de las células apoptóticas.

En este video, demostramos el ensayo de eferocitosis para estudiar el aclaramiento de células apoptóticas utilizando microscopía confocal. La eferocitosis es un proceso de varios pasos en el que las células apoptóticas son engullidas por fagocitos y degradadas dentro de vesículas llamadas eferosomas. Este protocolo proporciona un método para visualizar porciones internalizadas y no internalizadas de células apoptóticas individuales y cuantificar la eferocitosis.

En este video, demostramos que en presencia de un inhibidor del fosfodiéster, el ciclo celular del ovocito se detiene en la profase-I, durante la cual los ARNm transcritos se almacenan en ausencia de traducción. Después de la liberación del inhibidor, se reanuda la maduración de los ovocitos y las células entran en metafase. La señal del ARNm reportero fusionado con el gen diana en la metafase-I indica la activación de la maquinaria de traducción y la expresión de proteínas.

Este video describe un ensayo fluorométrico in vitro para evaluar los efectos de las formulaciones de lágrimas artificiales en la actividad metabólica celular de las células epiteliales de la córnea utilizando una solución de azul de Alamar a base de resazurina. Una formulación no tóxica mantiene las células en un estado saludable y metabólicamente activo, lo que facilita la reducción de la resazurina en una resorufina altamente fluorescente.

Este video describe un ensayo basado en imágenes de microscopía confocal para medir la absorción de calcio mitocondrial en células cultivadas. El ensayo utiliza el colorante fluorescente sensible al calcio Rhod-2/AM para medir el calcio mitocondrial en células cultivadas permeabilizadas.

Este video analiza el ensayo de fuga de fluorescencia para estudiar las interacciones de los péptidos que penetran en las células con las membranas celulares utilizando imitadores de membranas celulares: grandes vesículas unilaminares, o LUV, encapsuladas con un tinte fluorescente y un extintor.

Este video muestra una técnica de ensayo para evaluar la calcificación de las células intersticiales de la válvula aórtica in vitro. El ensayo ayuda a cuantificar la concentración de calcio utilizando el reactivo arsenazo III, un colorante sensible al calcio que reacciona con los iones de calcio para formar un complejo de calcio-arsenazo de color púrpura.

Este video describe la técnica para registrar la actividad epileptiforme de cortes organotípicos de la corteza rinal y el hipocampo ex vivo utilizando electrofisiología o configuración de EEG. Esto ayuda a estudiar la dinámica y la progresión de la epileptogénesis y a detectar posibles dianas terapéuticas para tratar la epilepsia.

Este video describe un ensayo de cicatrización de heridas de cocultivo sin contacto para evaluar la capacidad migratoria de mioblastos murinos. Esto ayuda a comprender los componentes de envío y recepción de señales de las interacciones de señalización Wnt paracrinas no canónicas in vitro.

El video muestra el ensayo del cometa para detectar daños en el ADN después de la exposición a agentes nocivos. En condiciones alcalinas, el ADN se desenrolla y se desnaturaliza, y tras la electroforesis, el ADN dañado y no dañado migra de manera diferente en el gel de agarosa, formando una estructura en forma de cometa. El ADN no dañado que migra lentamente forma la cabeza circular del cometa, mientras que los fragmentos de ADN dañados que migran rápidamente forman la cola alargada del cometa.

Este video muestra una técnica in vitro para estimar la absorción de aminoácidos por parte de las células estromales derivadas de la médula ósea. Los transportadores de aminoácidos dependientes de Na+ median la absorción de aminoácidos radiomarcados dentro de las células, y la absorción celular se estima midiendo la radiactividad.

En este video, demostramos el proceso de monitoreo en tiempo real de eventos celulares, incluida la proliferación de células adherentes, a través de un ensayo de impedancia celular. Aquí, las celdas adherentes actúan como aislantes, restringiendo el flujo de corriente entre los electrodos y aumentando la impedancia.

En este video, discutimos la correlación entre el CIT50 y la multiplicidad de infecciones virales. Las células infectadas por el virus muestran efectos citopáticos, causando su muerte y desprendimiento del microelectrodo de oro, lo que a su vez, reduce la impedancia.

Este video describe una técnica basada en impedancia celular para estudiar la cinética de supervivencia de los virus que inducen efectos citopáticos. El método mide la impedancia eléctrica de las células adherentes infectadas por el virus pretratadas con solución salina.

Este video demuestra el desarrollo de un modelo ex vivo de brote coroideo para estudiar la angiogénesis microvascular ocular. El ensayo consiste en cultivar explantes de ojo de ratón que contienen el tejido coroideo unido a la esclerótica y el epitelio pigmentario de la retina en condiciones específicas que promueven la germinación microvascular coroidea.

Este video describe un ensayo reportero basado en células para determinar la actividad estrogénica de compuestos derivados de plantas. Un compuesto con actividad similar al estrógeno imita su unión a los receptores de estrógeno e impulsa la transcripción de genes de la enzima reportera aguas abajo. La enzima reportera genera bioluminiscencia en una reacción, lo que indica la actividad estrogénica del compuesto.

Este video describe el ensayo de transferencia de energía de resonancia de Förster o TR-FRET resuelto en el tiempo para determinar la fosforilación de proteínas endógenas con la ayuda de fluoróforos donantes y aceptores marcados en anticuerpos específicos para una proteína de prueba. Esta técnica está diseñada para medir la fosforilación de las proteínas de prueba en los lisados celulares.

En este video, describimos un método basado en luminiscencia para evaluar la neurotoxicidad de los compuestos de moléculas pequeñas promotores del crecimiento de neuritas en la viabilidad de las neuronas derivadas de hNPC. El ensayo mide el nivel de ATP intracelular, un indicador de la viabilidad celular, para evaluar la neurotoxicidad después del tratamiento con compuestos de ensayo.

Este video muestra la técnica de multiespectrometría ecográfica por radiofrecuencia (REMS) para evaluar la densidad mineral ósea (DMO). El paciente se coloca en decúbito supino y se aplica gel de ultrasonido en el cuello femoral, un sitio propenso a fracturas en el fémur. A continuación, la sonda emite ondas de ultrasonido, que se reflejan en el tejido óseo a una velocidad influenciada por la DMO. La sonda capta estas ondas reflejadas, lo que permite la cuantificación de la DMO.

Este video muestra la aspiración percutánea de espermatozoides del epidídimo de un paciente con azoospermia, una condición caracterizada por la ausencia de espermatozoides en el semen. El procedimiento consiste en desinfectar el área escrotal, aspirar el líquido epididimario con una jeringa con una solución de cultivo especializada y procesar la muestra recolectada para aislar espermatozoides viables. Los espermatozoides preparados están listos para su uso en procedimientos avanzados de...

Fuente:Elettra Leo1, Luiza H.D. Cardoso1, Sabine Schmitt1, Erich Gnaiger11Instrumentos OroborosEste video explica cómo se utiliza el flujo de oxígeno para evaluar la respiración mitocondrial en células de mamíferos vivas y permeabilizadas. Demuestra el uso secuencial de digitonina, sustratos metabólicos, ADP, un desacoplador y un inhibidor para caracterizar diferentes estados respiratorios. El perfil de flujo de oxígeno resultante revela la función mitocondrial y la eficiencia de acoplamiento...

Este video describe una técnica de inmunoensayo que utiliza perlas magnéticas fluorescentes o microesferas junto con diferentes antígenos para detectar simultáneamente varios isotipos de anticuerpos en una muestra de suero. El ensayo es útil para comprender la seroconversión durante una infección o después de la vacunación.

En este video, demostramos un ensayo de inmunoprecipitación, llamado ensayo de captura VLP, para aislar partículas similares a virus que muestran antígenos, o VLP, de una muestra. El antígeno se une a anticuerpos específicos unidos a perlas magnéticas, formando un complejo antígeno-anticuerpo inmovilizado que luego se separa y almacena para su posterior análisis.

Este video muestra una técnica de cuantificación sensible de la fosforilación de proteínas utilizando un ensayo pull-down de una sola molécula. La funcionalización de la polietilenglicol-biotina y el uso de anticuerpos marcados aumenta la detección de tirosina fosforilada con especificidad.

Este video demuestra el método in vitro para la SUMOilación de proteínas de sustrato utilizando una cascada de enzimas secuencial. Además, el estado SUMOilado de la proteína se identifica mediante la técnica de electroforesis e inmunotransferencia.

En este video, mostramos el ensayo basado en el sistema bioreportero HiBit-RBD para detectar anticuerpos neutralizantes contra el SARS-CoV-2. Este sistema se dirige al dominio RBD viral mediante el uso de un sistema reportero bioluminiscente que contiene HiBiT fusionado con el dominio RBD.

En este video, demostramos un ensayo colorimétrico in vitro para detectar la presencia de anticuerpos neutralizantes contra vectores del virus adenoasociado recombinante 6 (rAAV6) que expresan fosfatasa alcalina en muestras de suero de ovejas. El ensayo utiliza la reacción entre el AAV que codifica un gen de fosfatasa alcalina de la placenta humana y su sustrato para generar un producto púrpura insoluble.

Este video muestra un ensayo altamente sensible basado en inmunofluorescencia para detectar el daño oxidativo inducido por PM2.5 en el corazón de embriones de pez cebra midiendo los niveles de 8-OHdG y γH2AX, que indican daño en el ADN y roturas de ADN de doble cadena, respectivamente.

Este video demuestra la técnica de evaluación de la muerte neuronal en cortes organotípicos de corteza rinal e hipocampo. La muerte neuronal se produce a través de convulsiones epilépticas en evolución, que se asemejan a la epilepsia in vivo, y se detecta mediante la tinción dual de las células muertas mediante yoduro de propidio e inmunofluorescencia.

Este video muestra la detección de complejos anticuerpo-antígeno químicamente conjugados a través de la técnica de ensayo de inmunoabsorción enzimática sándwich, o ELISA. El anticuerpo capturado se une al epítopo específico del antígeno del conjugado anticuerpo-antígeno, que puede visualizarse posteriormente utilizando un anticuerpo secundario ligado a una enzima.

En este video, demostramos un ensayo de inmunofluorescencia basado en EGFP para identificar la eficacia de las proteínas diana en el crecimiento de neuritas de las neuronas corticales primarias. Las neuronas primarias se transfectan con una proteína fluorescente, EGFP, y una proteína diana, y luego se realiza un inmunoensayo para investigar el efecto de la proteína diana en el crecimiento de las neuritas.

En este video, demostramos el inmunoensayo de electroquimioluminiscencia para la cuantificación de los niveles de proteínas objetivo en diferentes muestras. Este ensayo se basa en la luminiscencia producida en la reacción electroquímica. La intensidad de la luz emitida es proporcional a la cantidad de la proteína objetivo en la muestra.

El vídeo describe la preparación de una muestra de tejido para la obtención de imágenes por citometría de masas. El tejido se procesa primero para desenmascarar los epítopos del antígeno, permeabilizar las células y bloquear los sitios de unión de anticuerpos no específicos. Luego, el tejido se incuba con un cóctel de anticuerpos conjugados con metal y una tinción nuclear. Finalmente, se obtienen imágenes de la muestra de tejido tratada mediante un escáner óptico.

Este video muestra la preparación de plasma rico en plaquetas (PRP) de alta calidad mediante la detección del recuento de plaquetas, la recolección y centrifugación de sangre y el aislamiento de plaquetas. Este PRP se utiliza en aplicaciones terapéuticas para la regeneración y cicatrización de tejidos.