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Artículo de método

Una terapia basada en células para la artritis autoinmune en un modelo murino

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8 de julio de 2025

En este artículo

Resumen

Fuente: Haque, M. et al., Desarrollo de células T reguladoras específicas de antígenos derivadas de células madre contra la autoinmunidad.J. Vis. Exp. (2016)

Este video muestra una terapia basada en células para la artritis autoinmune en ratones. Las células T reguladoras derivadas de iPSC que expresan receptores específicos de ovoalbúmina se inyectan con albúmina sérica bovina metilada (mBSA) emulsionada en un adyuvante. Las células presentadoras de antígenos murinos (APC) procesan y presentan la mBSA a las células T, lo que provoca la activación de las células T y la migración a la membrana sinovial de la articulación de la rodilla. Las inyecciones posteriores involucran mBSA solo en la rodilla izquierda y una combinación de mBSA y ovoalbúmina en la rodilla derecha. En la rodilla izquierda, la respuesta inmunitaria a la mBSA desencadena la artritis, mientras que en la rodilla derecha, las células T reguladoras que interactúan con la ovoalbúmina mitigan la inflamación, mejorando los síntomas de la artritis.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado de animales y la junta de revisión veterinaria de JoVE.

1. Maduración in vivo y supresión de la artritis autoinmune

  1. Generar los constructos que se utilizarán en la transducción retroviral mediante la subclonación de los genes del receptor de células T (TCR) OT-II y la proteína 3 de la caja de horquilla (FoxP3) en el plásmido MiDR unido con el péptido 2A de autoescisión para crear el constructo MiDR-TCRα-2A-TCRβ-2A-FoxP3.
  2. Realizar la transducción retroviral de células madre p....

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Resultados

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Figura 1: La transferencia adoptiva de iPSC-Tregs específicos de Ag mejora el AIA en ratones. Las iPSC murinas se transducieron con la construcción retroviral MiDR, MiDR-FoxP3 o MiDR-TCR-FoxP3 y se cocultivaron enlas células b OP9-DL1/DL4/I-A. El día 7, las células transducidas por genes (3 × 106/ratón) se transfirieron adoptivamente a ratones hembra C57BL/6 ind.......

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Divulgaciones

No se han declarado conflictos de interés.

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Ratones C57BL/6jLaboratorio Jackson664
α-MEMInvitrogenA10490-01
FBSHycloneSH3007.01
Polibrenosigma107689
GenejammerCiencia integrada204130
mFlt-3LPeprotech250-31L
mIL-7PeprotechArtículo 217-17
mBSAsigmaA7906
Ovo-albúminaVanguardia0440-01
CfaDifco2017014
Sujetador de venas de colaBraintree científicoRTV 150-STD
ParaformaldehidosigmaP6148-500GPrecaución: Alergénico, cancerígeno,
Nocivo

Etiquetas

C lulas T reguladorasTregs derivadas de iPSCreceptores espec ficos de ovalb minaBSA metiladaemulsi n adyuvantec lulas presentadoras de ant genosmol culas del MHCactivaci n de c lulas Tinyecci n en la articulaci n de la rodillainducci n de artritis