Inmunización intranasal con BCG en un modelo de ratón

Resumen

Fuente: Uranga, S. et al., Eficacia protectora y respuesta inmune pulmonar tras la administración subcutánea e intranasal de BCG en ratones.J. Vis. Exp. (2016)

Este video muestra la inmunización intranasal con BCG en ratones, activando tanto las respuestas inmunitarias innatas como las adaptativas, lo que lleva al desarrollo de células T de memoria residentes en el pulmón y células B efectoras, mejorando así la protección contra las infecciones por Mycobacterium.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado de animales y la junta de revisión veterinaria de JoVE.

>1. Preparación de reservas cuantificadas de glicerol de Bacillus Calmette-Guerin (BCG) danés y Mycobacterium tuberculosis H37Rv

NOTA: Todos los protocolos descritos se realizaron en condiciones de nivel de bioseguridad 3 (BSL3).

1. Descongele las existencias congeladas de glicerol de las cepas BCG danesas o H37Rv e inocule 100 μl en 10 ml de medio 7H9 suplementado con Tween-80 0,....

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Caldo Middlebrook 7H9	Bd	271310
Enriquecimiento de Middlebrook ADC	Bd	211887
Preadolescente 80	Scharlau	TW00800250
Perlas de vidrio de 3 mm de diámetro	Scharlau	038-138003
Agar Middlebrook 7H10	Bd	262710
Jeringa de 1 ml 26GA 0,45x10 mm	Bd	301358
Tubos C	Miltenyi Biotec	130-093-237
Tubos M	Miltenyi Biotec	130-093-236
CERRADURA LACHRYMAL OLIVE LUER 0.60 x 30 mm. 23G x 1 1/4"	UNIMED	27.134	Se utiliza como cánula de tráquea para el LBA
Albúmina, procedente del suero bovino	sigma	A4503