Un ensayo in vitro para evaluar la citotoxicidad de las células asesinas naturales contra las células cancerosas

Resumen

Fuente: Baik, C. H., et al. A Ensayo de citotoxicidad en placa para la evaluación de la función citolítica de las células asesinas naturales de la placenta de rata. J. Vis. Exp. (2019)

Este video muestra la realización de un ensayo de liberación de lactato deshidrogenasa para determinar la citotoxicidad de las células asesinas naturales (NK) contra las células cancerosas objetivo. El ensayo cuantifica la liberación de la enzima lactato deshidrogenasa citoplasmática de las células cancerosas midiendo la absorbancia del producto de color rojo formado.

Protocolo

1. Ensayo de citotoxicidad: Protocolo de ensayo

1. Utilice una placa de 96 pocillos tratada con cultivo de fondo redondo para configurar la placa como se sugiere en la Tabla 1. Esta tabla muestra los controles experimentales y 3 conjuntos de columnas experimentales NK. Esto se puede expandir a un total de 10 columnas experimentales NK en una placa de 96 pocillos.
2. Centrifugar la placa de ensayo a 250 x g durante 4 minutos para asegurarse de que las células efectoras y diana están en contacto. Incubar la placa de 96 pocillos durante 5 horas en una incubadora de cámara humidificada a 37 °C, 5% de CO₂ para lo....

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Placa de cultivo de tejidos de 96 pocillos	CELLTREAT	229190	estéril, fondo redondo
Raspador de células	pescador	8100241
Cytotox 96 Kit de ensayo de citotoxicidad no radiactiva	Promega	G1780
RPMI	Gibco	11875135	1640 Medio
Célula YAC-1	ATCC	TIB-160