Crecimiento y diferenciación de neuronas cargadas de nanopartículas magnéticas en plataformas magnéticas

Resumen

Fuente: Indech, G., et al. Fabricación de plataformas magnéticas para la organización a escala micrométrica de neuronas interconectadas. J. Vis. Exp. (2021).

Este video demuestra la absorción de nanopartículas magnéticas fluorescentes (MNPs) por las células neuronales a través de la endocitosis. El crecimiento de estas neuronas cargadas de MNP en el sustrato con patrón magnético permite la unión de las células. La adición de un factor de crecimiento que contiene medio ayuda en el crecimiento de las extensiones de neuronas, mientras que el campo magnético del sustrato dirige la orientación de la extensión.

Protocolo

1. Absorción de nanopartículas magnéticas celulares (MNP)

1. Prepare el medio de crecimiento básico para el cultivo de células PC12 agregando 10 % de suero de caballo (HS), 5 % de suero fetal bovino (FBS), 1 % de L-glutamina, 1 % de penicilina/estreptomicina y 0,2 % de anfotericina al medio del Roswell Park Medical Institute (RPMI) y filtre con un filtro de nailon de 0,22 μm.
2. Agregue 1% de suero de caballo (HS), 1% de L-glutamina, 1% de penicilina/estreptomicina y 0,2% de anfotericina al medio RPMI para preparar el medio de diferenciación PC12 y filtre con un filtro de nailon de 0,22 μm.
3. Cultive las células en un matraz de....

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Placa de cultivo celular de 6 pocillos	halcón	353846
Placa de cultivo celular de 96 pocillos	SPL ciencias de la vida	30096
Solución de anfotericina B	Industrias Biológicas	03-028-1B
Albúmina sérica bovina (BSA)	Industrias Biológicas	03-010-1B
Matraz de cultivo de células y tejidos	Biofil	TCF002250	75.0 cm^2 250 mL Tapón de ventilación, sin tratar
Placa de cultivo celular	Greiner Bio-One	627-160	35 milímetros
Tubo de centrífuga	Biofil	CFT021500	50 mL
Colágeno tipo I	Corning Inc.	354236	Cola de rata, rango de concentración 3-4 mg/mL
Aguja desechable	KDL		23 G
Jeringa desechable	Medispo	1160227640	10 mL
Suero de caballo donante	Industrias Biológicas	04-124-1A
Etanol 70%	ROMICAL LTD	19-009102-80
Etanol absoluto (deshidratado)	Biolab-químicos	52505
Suero fetal bovino (FBS)	Industrias Biológicas	04-127-1A
β-NGF murino fresco	Peprotech	450-34
Electroimán de marco C GMW.	Buckley systems LTD		3470, 45 milímetros
L-glutamina	Industrias Biológicas	03-020-1B
PBS 10x	Hylabs	BP507/1LD
Línea celular PC12	ATCC	CRL-1721
Solución de penicilina-estreptomicina nistatina	Industrias Biológicas	03-032-1B
RPMI 1640 con l-glutamina	Industrias Biológicas	01-100-1A