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Artículo de método

Preparación de cortes colínculo-talamocorticales a partir del cerebro de un cachorro de ratón

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8 de julio de 2025

En este artículo

Resumen

Fuente: Slater, B. J., et al., Modificación de un corte de cerebro de ratón colículo-talamocortical, incorporando impresión 3D de componentes de cámara e imágenes ópticas multiescala. J. Vis. Exp. (2015)

El video muestra la preparación de cortes de cerebro colístico-talamocortical a partir de cerebros de cachorros de ratón. Un cerebro aislado se alinea en un portaobjetos marcado y se corta en ángulo para alinear el cerebro auditivo, el mesencéfalo y el prosencéfalo en el mismo plano. A continuación, el cerebro se corta con un vibrátomo, y los trozos que contienen las principales estructuras auditivas, del mesencéfalo y del prosencéfalo se transfieren a una cámara de retención para su conservación.

Protocolo

Todos los procedimientos relacionados con la recolección de muestras se han realizado de acuerdo con las directrices del IRB del instituto.

>1. Preparación y extracción del cerebro del ratón para cortarlo

  1. Prepárese para la incubación de la perfusión y el corte.
    1. Aproximadamente 30 minutos antes de cortar, prepare una solución de corte con alto contenido de sacarosa y líquido cefalorraquídeo artificial (aCSF) con bajo contenido de calcio para la incubación de la rebanada antes del registro o la toma de imágenes.
    2. Coloque todas las herramientas necesarias (tijeras grandes de punta roma, tijeras....

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Resultados

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Figura 1. Imágenes de autofluorescencia de flavoproteínas de un corte de cerebro colículo-talamocortical.(A) Corte de cerebro colículo-talamocortical conectado confirmado por autofluorescencia de flavoproteínas. Estimulación eléctrica a 0,05 Hz de CI imageizada a 4 Hz y procesada en Fourier para mostrar la potencia a la frecuencia de estimulación. Nótese la activación de la MGB, e.......

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Divulgaciones

No se han declarado conflictos de interés.

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Solución de corte con alto contenido de sacarosaen mM: 206 sacarosa, 10,0 MgCl2, 11,0 glucosa, 1,25 NaH2PO4, 26 NaHCO3, 0,5 CaCl2, 2,5 KCl, pH 7,4
ACSF bajo en calcioen mM: 126 NaCl, 3,0 MgCl2, 10,0 glucosa, 1,25 NaH2PO4, 26 NaHCO3, 1,0 CaCl2, 2,5 KCl, pH 7,4
aCSFen mM: 126 NaCl, 2.0 MgCl2, 10.0 glucosa, 1.25 NaH2PO4, 26 NaHCO3, 2.0 CaCl2, 2.5 KCl, pH 7.4
DmsoTecnologías de la VidaD12345Lote: 1572C502
Gran plato de cultivoMarca Pescadora08-757-13Plato de cultivo de 100x15mm
Pequeño plato de cultivohalcón353001Plato de cultivo de 35x10mm
Membrana de cultivo elevadaMiliceldaPICMORG50Se utiliza para mantener la perfusión de líquido oxigenado en ambos lados de la loncha.
Agar para bloquear el cerebro3% en peso en agua

Etiquetas

Corte con vibrátomoseccionamiento cerebralmesencéfalo auditivoalineación del prosencéfalocámara de sujeciónbloques de agaradhesivo de cianoacrilatoimpresión 3D