Generación de un corte coronal del cerebro que expone las regiones de la amígdala desde el cerebro de un ratón

Abstract

Fuente: Bosch, D., et al. Disección Optogenética Ex Vivo de Circuitos de Miedo en Cortes de Cerebro. J. Vis. Exp. (2016).

Este video muestra la preparación de finos cortes coronales del cerebro de un cerebro murino, exponiendo las regiones de la amígdala ricas en conexiones sinápticas de la corteza prefrontal medial. A continuación, los trozos se recuperan en líquido cefalorraquídeo artificial oxigenado para mantener la viabilidad neuronal.

Protocol

1. Preparación de Cortes Agudos

1. Prepare ACSF, solución de corte, herramientas (tijeras, bisturí, pinzas, espátula, pipeta Pasteur) y bloques de agar.
   NOTA: Se requiere 1 L de líquido cefalorraquídeo artificial (ACSF) por experimento. Como se publicó anteriormente, el ACSF se prepara disolviendo productos químicos en H2O bidestilado. La solución de corte se prepara suplementando 200 ml de ACSF con 0,87 ml de solución madre de 2 M MgSO₄.
2. Oxigenar ACSF y solución de corte durante todo el experimento con 95% de_O2 y 5% de_CO2.
3. Anestesiar profundamente al ratón con una m....

Results

Figura 1. Inyecciones estereotácticas, preparación de cortes agudos de cerebro y visualización de fibras presinápticas. (A, B) Inyección estereotáctica de virus. A) Imagen de un ratón anestesiado colocado en un marco estereotáctico con el cráneo expuesto y la pipeta de inyección. Recuadro: Amplíe la imagen de la pipeta de inyección llena de solución viral mezclada con verde rápido. B.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Líquido cefalorraquídeo artificial (ACSF, por sus siglas en inglés)	Para la composición ver referencias #16 y #23
Soluciones de parches internos	Para la composición ver referencias #16 y #23
Cortadora, Microm HM650V	Fisher Scientific, Alemania	920120
Unidad de enfriamiento para cortadora de tejidos, CU65	Fisher Scientific, Alemania	770180
Hoja de zafiro	Cuchillos de diamante Delaware
Estereoscopio, SZX2-RFA16	Olimpo, Japón